輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼,二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水,改善金環電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后,關閉暗紅光。可以先嘗試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測,確認一下信號的質量:如果雙眼的振幅出現了與預期不同的較大差異,建議再次檢查金環電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是,完成暗適應·s/m2光強檢測后,系統將自動打開背景光。同樣的,需要打開定時器,光適應10-15分鐘,再記錄。6經過光適應后,依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強下波形,記錄·s/m2光強下閃爍視網膜誘發電位。結果發現在4個月時,與ctrl(對照)小鼠比較,cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應和光適應條件下均明顯降低,表明gm20541敲除后導致視力受損(見圖5和圖6)。實施例4視網膜石蠟切片h&e染色:對4月齡小鼠的視網膜進行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色,具體操作如下:1)快速取小鼠眼球組織,并置于固定液中固定24h;2)石蠟包埋,切片,厚度為4μm;3)切片常規用二甲苯脫蠟。通過建立腦缺血-再灌注動物模型,模擬人類ICVD的病理過程。湖南模式動物模型實驗
通過無極調控微負壓裝置來調節飼養倉2內的壓力,通過高原低氧環境模擬裝置來調整飼養倉2內氧含量,當需要燈光時,通過高原光照環境模擬裝置15開啟紫外燈以及照明燈,通過高原溫度環境模擬裝置16來進行調溫,通過高原濕度環境模擬裝置17調節飼養倉2內濕度,通過動物行為學遠程觀察單元18可以監控動物的行為,飼養倉2內若干代謝籠3配備投料斗8、飲水瓶9可以進行攝食量、飲水量測定,聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12便于模型動物的尿液和糞便常規檢測,并且本系統設置的多個代謝籠3可以同時培養多種動物,造模動物多。實施例2在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,所述無極調控微負壓裝置包括進風系統13、排風系統14和霍尼威爾或西門子調控模塊,所述進風系統13設置在功能設備集成底座1內,所述排風系統14設置在飼養倉2頂部。本實施例的工作原理:本系統進風系統13內集成有進風風機單元、排風系統14集內成有排風風機單元。由于飼養倉2能夠密封,通過改變風機風量的方式來調節壓差,進風風機單元和排風風機單元均與飼養倉2連通,通過調節進、排風的壓力差值,系統內環境能夠形成(~)微負壓,系統配置霍尼威爾或西門子調控模塊。上海高脂高糖動物模型培養可提供專業的大鼠小鼠動物疾病模型技術,包含心血管系統神經系統、呼吸系統、生殖、泌尿系統、成瘤系統等。
結果發現在這些組織中,gm20541均有表達,說明該基因可能在體內發揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結束后,根據需要,裁剪適當大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉膜2h。(6)轉膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據一抗來源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發光試劑盒檢測蛋白。
17-高原濕度環境模擬裝置,18-動物行為學遠程觀察單元,19-功能控制面板。具體實施方式為了使本實用新型的目的、技術方案及優點更加清楚明白,以下結合附圖及實施例,對本實用新型進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例用以解釋本實用新型,并不用于限定本實用新型,即所描述的實施例是本實用新型一部分實施例,而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設計。因此,以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本實用新型的范圍,而是表示本實用新型的選定實施例。基于本實用新型的實施例,本領域技術人員在沒有做出創造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本實用新型保護的范圍。需要說明的是,術語“”和“第二”等之類的關系術語用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區分開來,而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關系或者順序。而且,術語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素。建立SD大鼠頸動脈損傷(結扎套管)模型。
靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當天跑膠,我會等上層膠凝2個小時再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個小時的時候沿著梳子上緣加點電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內槽漏液就不是勻強電場了,條帶可能就不是一條直線。然后內槽倒滿電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩往上拔出,然后觀察泳道內有無脫落的膠粒或者膠絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來,不然樣品中SDS可能會結晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉膜1、轉膜前準備我會在電泳結束0分鐘準備,把轉膜液配好置于4度冰箱預冷,然后裁膜,準備轉膜裝置。通過高脂飲食誘導構建非酒精性脂肪肝模型。湖北兔動物模型技術
通過截斷大鼠面部神經致面癱模型的建立。湖南模式動物模型實驗
省心省時一些基因編輯鼠模型表型不易發現,需要結合外科手術造模、物理刺激或藥物誘導才能發現表型。專業的手術模型團隊結合成熟穩定的基因修飾鼠平臺和飼養繁育平臺,賽業生物可為您提供一站式“基因編輯鼠模型制備——種群擴繁——手術造模——表型驗證”服務,讓您省心省時。3.專業的技術支持賽業生物專業的小動物外科手術團隊熟練掌握多種模型的制備,具備建立復雜及復合手術疾病模型的能力,可能夠根據您的需求,制定合理的實驗計劃,同時提供及時的項目匯報與售后服務,讓您省事省心。,確保動物福利與質量標準與國際接軌賽業模式動物中心通過ISO9001:2015和AAALAC雙認證,ISO9001:2015認證確保向廣大學者提供的所有產品和技術服務符合國際標準,AAALAC認證表明了賽業生物尊重動物福利和倫理,重視生物安全的負責態度。適用動物品種:大鼠、小鼠。手術疾病模型團隊首席科學家簡介張榮利博士張榮利博士有二十多年小鼠手術疾病模型制備經驗,畢業后先后在中國中醫科學院、清華大學、北京大學及國際學術機構任職,2011年起在美國CaseWesternReserveUniversity工作,任ResearchScientist并擔任心血管生理學實驗室主任,負責基因工程動物的疾病表型發現與新藥臨床前研究。湖南模式動物模型實驗