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江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-12-07

    中風(fēng)模型)股動(dòng)脈內(nèi)皮損傷模型頸動(dòng)脈結(jié)扎或部分結(jié)扎術(shù)深靜脈血栓模型下肢缺血模型門腔靜脈分流術(shù)左、右心血流動(dòng)力學(xué)測試左心系統(tǒng)測壓右心系統(tǒng)測壓腹部手術(shù)膽管結(jié)扎術(shù)胃大部切除術(shù)小腸部分切除術(shù)急性腎衰模型單側(cè)腎切除術(shù)3/4腎切除術(shù)5/6腎切除術(shù)脾切除術(shù)腎上腺切除術(shù)腎上腺髓質(zhì)摘除術(shù)骨關(guān)節(jié)炎模型脾神經(jīng)切除術(shù)肝臟迷走神經(jīng)切斷術(shù)胃迷走神經(jīng)切斷術(shù)膈下迷走神經(jīng)切斷術(shù)去勢術(shù)輸精管結(jié)扎術(shù)卵巢切除術(shù)單側(cè)或雙側(cè)輸卵管結(jié)扎術(shù)子宮切除術(shù)輸尿管結(jié)扎術(shù)神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)單側(cè)腦內(nèi)定位插管雙側(cè)腦內(nèi)定位插管側(cè)腦室導(dǎo)管側(cè)腦室微量滲透泵導(dǎo)管第3腦室插管腓腸肌神經(jīng)切除術(shù)軟組織手術(shù)甲狀腺切除術(shù)甲狀旁腺切除術(shù)甲狀腺切除術(shù)伴甲狀旁腺再植入術(shù)胸腺切除術(shù)松果體切除術(shù)垂體切除術(shù)傳感器植入手術(shù)血壓遙測左心室壓遙測門靜脈壓遙測血壓與心電圖遙測血壓與腦電圖遙測胸內(nèi)壓遙測胸內(nèi)壓與心電圖遙測心電圖遙測腦電圖遙測肌電遙測心電圖與腦電圖遙測腦電圖與肌電遙測血糖遙測體溫與活動(dòng)度遙測血管導(dǎo)管手術(shù)頸動(dòng)脈導(dǎo)管顱內(nèi)給藥頸動(dòng)脈導(dǎo)管腹主動(dòng)脈導(dǎo)管股動(dòng)脈導(dǎo)管股靜脈導(dǎo)管單側(cè)頸靜脈導(dǎo)管雙側(cè)頸靜脈導(dǎo)管門靜脈導(dǎo)管下腔靜脈導(dǎo)管非血管導(dǎo)管手術(shù)膽管導(dǎo)管胃導(dǎo)管十二指腸導(dǎo)管空腸導(dǎo)管回腸導(dǎo)管盲腸導(dǎo)管結(jié)腸導(dǎo)管膀。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分,其毒副作用之一是引起肺纖維化。江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn),動(dòng)物模型

    40mmnaoh,),并在金屬浴100℃加熱1h;(3)取出離心管,冷卻至室溫后,加入100μl的中和液(40mmtris-hcl,),10000g離心2min后,取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴(kuò)增:按照如系配置pcr反應(yīng)體系2×taqmix:10μl尾巴組織裂解液:2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward):1μl(濃度:10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse):1μl(濃度:10mm)ddh2o:6μl。引物序列如下:gm20541-loxp-forward序列:5’-attccccttcaagatagctac-3’;gm20541-loxp-reverse序列:5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’;six3-cre-forward序列:5’-gccgccgggatcactctcg-3’;six3-cre-reverse序列:5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴(kuò)增程序:pcr反應(yīng)體系配制完后,在pcr儀上于95℃預(yù)加熱5分鐘使模板dna充分變性,然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。在每一個(gè)循環(huán)中,先于95℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復(fù)性溫度58℃,保持30秒,使引物與模板充分退火;在72℃保持30秒,使引物在模板上延伸,合成dna,完成一個(gè)循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25次,使擴(kuò)增的dn段大量累積。,在72℃保持5分鐘,使產(chǎn)物延伸完整,4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。

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    靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關(guān)鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產(chǎn)生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當(dāng)天跑膠,我會等上層膠凝2個(gè)小時(shí)再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個(gè)小時(shí)的時(shí)候沿著梳子上緣加點(diǎn)電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準(zhǔn)備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內(nèi)槽漏液就不是勻強(qiáng)電場了,條帶可能就不是一條直線。然后內(nèi)槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩?fù)习纬?,然后觀察泳道內(nèi)有無脫落的膠?;蛘吣z絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準(zhǔn)備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習(xí)慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時(shí)候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來,不然樣品中SDS可能會結(jié)晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉(zhuǎn)膜1、轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備我會在電泳結(jié)束0分鐘準(zhǔn)備,把轉(zhuǎn)膜液配好置于4度冰箱預(yù)冷,然后裁膜,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)膜裝置。

    準(zhǔn)備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘,然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾,這一步很關(guān)鍵,重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會翻車),可以加多點(diǎn)轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液,設(shè)置電源參數(shù),我習(xí)慣恒流轉(zhuǎn)膜,200-280毫安,1-2小時(shí),根據(jù)分子量定,如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個(gè)電源帶兩個(gè)轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠,我就會用恒壓70-110V。這個(gè)過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度,分離膠的濃度,轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用,因?yàn)檗D(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上,1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時(shí)間可以減少,從而減少發(fā)熱,以免膠變形,條帶也會更好看。然后是分離膠的濃度,如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠,200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的,小于30KD的200mA30分鐘,30-100KD的按分子量的數(shù)值算,如70KD,250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于,),120分鐘足矣,前提是膠的濃度相適應(yīng)。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。卵巢切除致骨質(zhì)疏松大鼠模型。

江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn),動(dòng)物模型

    SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線栓直徑(體重250-300g)【方法】1、10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定,頸正中線切口,分離肌肉和筋膜,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。3、微動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),活扣結(jié)扎近心端頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)打雙結(jié),在雙結(jié)中間剪開小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),用眼科鑷輕推拴線,以頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)分叉處為參考位置。5、栓線插入預(yù)刻深度,感到有阻力,說明栓線已到達(dá)腦中動(dòng)脈(MCA),打結(jié)固定栓線。6、血管外的栓線不要留得過長,1h后拔出栓線,縫合傷口,單籠飼養(yǎng)觀察。注:前兩三天老鼠會萎靡,不進(jìn)食,注意不要,老鼠無死亡即可。APOE-/-鼠左頸動(dòng)脈結(jié)扎糖尿病模型。湖南腦定位動(dòng)物模型手術(shù)

特發(fā)性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立。江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

    相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視力提高;(2)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視網(wǎng)膜外核層變厚;(3)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視網(wǎng)膜外節(jié)增長。第四方面,本發(fā)明實(shí)施例提供了一種視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的繁育方法,其包括:將由如上所述的方法得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型進(jìn)行自交。在由方面所述的構(gòu)建方法得到了視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的基礎(chǔ)上,為了獲得更多的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,本領(lǐng)域技術(shù)人員容易想到直接將上述的構(gòu)建方法得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型進(jìn)行自交以繁育或培育出更多數(shù)量的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。附圖說明為了更楚地說明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案,下面將對實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹,應(yīng)當(dāng)理解,以下附圖示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例,因此不應(yīng)被看作是對范圍的限定,對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。圖1:檢測gm20541基因在不同組織中的表達(dá);圖中:a:rt-pcr檢測gm20541基因在不同組織的表達(dá)結(jié)果。江蘇大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

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