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江蘇基因敲除動物模型建模

來源: 發布時間:2023-12-07

    然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結果見圖8,在小鼠4月齡時,通過視網膜冰凍組織切片染色外節抗體rhodopsin以及內節抗體nak-atpase后發現,相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網膜外節明顯縮短,表現出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發明實施例以小鼠為例,通過cre-loxp基因敲除技術,在小鼠視網膜前體細胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現出了視力受損,視細胞外節變短退化以及視細胞丟失等視網膜色素變性疾病典型表征。由此充分說明,在視網膜前體細胞敲除gm20541基因,可以使目標動物表現出視網膜色素變性疾病。視網膜前體細胞敲除gm20541基因的動物,可以作為視網膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網膜色素變性疾病研究等領域中,為該疾病的研究例如發病過程、機制以及相關藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發明實施例展示了在小鼠的視網膜前體細胞敲除gm20541基因后的表型,但本領域技術人員容易理解到,小鼠作為哺乳動物的代表性動物,在其他的哺乳類動物中敲除gm20541基因或其同源基因也應當具有相似的表型。C57BL/6成年鼠肺部通過呼吸機過量通氣損傷模型的建立;江蘇基因敲除動物模型建模

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    IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型,并觀察模型的生化及病理指標特點。【材料】1、酸化水:鹽酸調滅菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,滅菌水配制;【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持續8周;2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持續8周;3、分別于第6、8周以()尾靜脈注射LPS,1次/周;4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細胞;5、每日觀察精神、飲食、大小便,第9周處死,取血和腎、肝做相應檢查;6、取尿液后2000r/min離心10min,取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值,鏡下觀察尿沉渣中有無紅細胞。寧夏腦定位動物模型技術采用復合改良法造模,是目前 IgA 腎病中較為可靠、穩定、成功率高,且病理、臨床指標近人類 IgA 腎病的動物模型。

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    痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠,雄性,周齡6~8W,體重:200~250g【方法】1、大鼠麻醉,顱頂脫毛備皮;2、大鼠腦定位儀固定大鼠,顱頂正中切口,長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫;3、縫線將皮膚左右分開固定,前囟后10mm、矢狀縫左側;4、微量注射器移至開孔處修正骨孔,注射器垂直向顱內插入,緩慢注射無水乙醇15ul,注射完移除注射器,棉球壓迫止血;5、縫合創口后維持25°體溫,等待蘇醒,觀察大鼠狀態。【觀察】術后3天模型大鼠攝食減少、右側肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯,順時針繞圈前行,2周后癥狀減輕,大鼠于術后4周開始給予動物行為學觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現細胞水腫,排列不規則,結構紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質軟化灶和空囊形成,小膠質細胞浸潤,星形膠質細胞肥大、增生等病理表現。曠場測試(OpenFieldTest):實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內,然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應等。水迷宮測試。

    40mmnaoh,),并在金屬浴100℃加熱1h;(3)取出離心管,冷卻至室溫后,加入100μl的中和液(40mmtris-hcl,),10000g離心2min后,取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴增:按照如系配置pcr反應體系2×taqmix:10μl尾巴組織裂解液:2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward):1μl(濃度:10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse):1μl(濃度:10mm)ddh2o:6μl。引物序列如下:gm20541-loxp-forward序列:5’-attccccttcaagatagctac-3’;gm20541-loxp-reverse序列:5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’;six3-cre-forward序列:5’-gccgccgggatcactctcg-3’;six3-cre-reverse序列:5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴增程序:pcr反應體系配制完后,在pcr儀上于95℃預加熱5分鐘使模板dna充分變性,然后進入擴增循環。在每一個循環中,先于95℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復性溫度58℃,保持30秒,使引物與模板充分退火;在72℃保持30秒,使引物在模板上延伸,合成dna,完成一個循環。重復這樣的循環25次,使擴增的dn段大量累積。,在72℃保持5分鐘,使產物延伸完整,4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。人類疾病的動物模型是指各種醫學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現的動物。

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    糖尿病足大鼠模型【目的】構建糖尿病足大鼠模型;【材料】1、材料:STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉;2、試劑配制:1)檸檬酸納緩沖液配制:A液十B液=1:,PH=;A液:檸檬酸mL;B液:朽檬酸三納2)STZ液配制:55mg/kg(避光,現配現用10min內注射);3、糖尿病模型構建方法:1)大鼠術前禁食12h;2)按55ug/g注射.連續3天注射,對照組注射檸檬酸緩沖液,造模組注射STZ液,注射后不禁水、禁食2-4h;3)STZ注射結束5天后空腹測血糖,血糖值高于12mmol/L選入實驗組;【方法】方法一:細菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時,后足背側注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液,造成糖尿病肢端的動物模型;2、后續觀察傷口情況;方法二:皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術剪做一個圓形皮膚創口,直徑5mm;2、后續每日觀察傷口情況,作好記錄。博來霉素誘導急性肺損傷小鼠模型。寧夏模式動物模型構建

通過博來霉素誘導的肺炎樣癥狀及肺纖維化癥狀模型為研究ALL的有效措施提供理想的動物模型。江蘇基因敲除動物模型建模

    角膜環鉆致角膜損傷兔模型一、服務信息1、動物模型名稱:角膜環鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2021角膜環鉆致角膜損傷兔模型5周詢價1、實驗方法:角膜環鉆致兔角膜機械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯合肌肉注射速眠新Ⅱ進行兔麻醉。環鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴**2滴消毒,以保持結膜清潔。開瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環鉆分別在兔眼角膜上作環切,并滴入2滴氯霉素眼**潤洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細眼剪小心去掉角膜損傷區域上皮,術畢,滴氯霉素眼**2滴。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。江蘇基因敲除動物模型建模

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