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磁珠法PCR/DNA純化試劑盒

來源: 發布時間:2024-11-13

提取的病毒核酸可以直接用于多種實驗,主要包括:1.**實時熒光定量PCR(qPCR)**:這是一種常用的技術,可以對病毒核酸進行定量檢測。它通過實時監測PCR過程中的熒光信號來確定病毒核酸的數量。例如,病毒核酸檢測就是基于此技術,通過設計特異性引物和探針,對病毒的靶基因進行定性檢測。2.**逆轉錄PCR(RT-PCR)**:這項技術用于檢測RNA病毒,通過將病毒RNA逆轉錄成cDNA,然后進行PCR擴增,以檢測病毒的存在。RT-PCR技術靈敏而且用途廣,可以用于檢測細胞、組織中RNA病毒的含量。3.**等溫擴增法**:包括環介導的等溫擴增(LAMP)和切口延伸等溫擴增(NEAR),這些方法在恒溫條件下進行,無需復雜的設備,適用于快速、現場的病毒核酸檢測。4.**數字PCR(dPCR)**:這是一種高度靈敏的技術,可以對病毒核酸進行定量。它通過將樣本分配到成千上萬的微小反應室中,每個反應室單獨進行PCR擴增,從而實現對病毒核酸的精確計數。5.**核酸雜交技術**:如熒光原位雜交(FISH),可以用于檢測特定病毒核酸序列在細胞或組織中的存在和定位。FnCas12a可以識別不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',這增加了它可以靶向的基因組區域 。磁珠法PCR/DNA純化試劑盒

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒,標準物質

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應用非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**PCR產物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、鹽類等雜質,回收率高,產物純度好,可以直接應用于PCR、連接、測序、NGS建庫等下游實驗。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液、唾液、口腔拭子和動物組織等樣品中分離純化高質量基因組DNA,提取的DNA片段大,純度高,質量穩定可靠,適合高通量工作站的自動化提取。3.**質粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質粒DNA,通過精心優化的溶液將質粒DNA從基因組DNA和蛋白質中分離出來。4.**DNA片段的分離**:有許多類型的DNA分離試劑盒可供選擇,包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測序協議進行分離,在這種情況下,可以用能選擇分子大小的磁珠來分離片段。5.**自動化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動化工作站或核酸自動提取儀,實現高通量操作。6.**分子生物學研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進化研究等領域有廣泛應用,為遺傳病研究、篩查等提供了強有力的技術支持。Recombinant Human DLL3 (27-215) Protein,His-Flag Tag泛素連接酶E3識別特定的靶蛋白,并促進E2上的泛素轉移到靶蛋白的賴氨酸殘基上,形成泛素化標記。

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒,標準物質

耐高鹽全能核酸酶(SaltActiveUltraNuclease)是一種重組非特異性核酸內切酶,具有以下特點和應用:1.**來源與表達**:耐高鹽全能核酸酶來源于海洋微生物,通過基因工程改造在大腸桿菌(_Escherichiacoli_)中表達純化。2.**活性條件**:在0.5MNaCl條件下具有比較好活性,這使得它在高鹽環境下也能保持高效。3.**應用領域**:-**病毒純化、疫苗生產**:作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿主殘留核酸降至皮克(pg)級別,提高生物制品功效和安全性。-**蛋白和多糖類制藥工業**:用于去除核酸污染,降低細胞上清和細胞裂解液的粘度,提高蛋白純化效率及功能研究。-**防止細胞結團**:有效防止細胞和疫苗研究中外周血單核細胞(PBMC)的結團。4.**產品性質**:-分子量:24.7kDa。-等電點:9.61。-純度:≥99%。-酶活:250-300U/μL。-適溫度:37℃(工作范圍0-42℃)。-輔助因子:1-10mMMg2+。5.**儲存條件**:以無菌液體酶的形式提供,儲存于緩沖液(25mMTris-HCl,5mMMgCl2,500mMNaCl,50%Glycerol,pH7.5)中,無色透明液體。干冰運輸,-15℃~-25℃保存,有效期2年。

確保Cre重組酶只作用于特定細胞,主要通過以下幾種方式實現:1.**組織特異性啟動子**:-利用組織特異性啟動子控制Cre重組酶的表達,可以確保Cre酶只在特定組織或細胞中表達。這種方法通過將Cre基因置于特定細胞類型特有的啟動子控制之下,實現對Cre酶表達的精確控制。2.**誘導型Cre重組酶系統**:-通過使用Cre-ERT(雌素受體突變體與Cre重組酶的融合蛋白),可以實現對Cre活性的時間控制。在無他莫昔芬誘導時,Cre-ERT與熱激蛋白Hsp90結合,定位于細胞質中;當他莫昔芬給藥誘導時,Hsp90脫離Cre-ERT,使Cre-ERT進入細胞核發揮基因重組的作用。這種系統相當于為Cre-Lox系統加裝了一個由他莫昔芬控制的外源開關,使得體內基因編輯更具時空靈活性。3.**藥物誘導的Cre系統**:-例如Tet-on系統,通過四環素或其衍生物多西環素的添加來激起基因表達。在三重轉基因動物中,rtTA在特定啟動子的控制下表達,多西環素與rtTA結合,Cre的表達,導致固定的報告基因重組。4.**AAV遞送Cre**:-利用包含組織特異性啟動子的腺相關病毒(AAV)載體可以選擇性地將Cre重組酶遞送至特定細胞。


通過工程化改造,如將FnCas12a與單鏈DNA外切酶融合,可以提高基因編輯效率,擴大FnCas12a可以靶向的范圍 。

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒,標準物質

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一種來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillussubtilis)的DNA聚合酶。這種酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性,但缺失了5'-3'核酸外切酶結構域,因此它具有鏈置換活性,可以用于重組酶聚合酶擴增(RPA)等恒溫擴增技術。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些關鍵特性和應用:1.**活性定義**:在37°C條件下,30分鐘內將10nmol的dNTP摻入酸不溶性物質所需的酶量定義為1個活性單位(U)。2.**熱失活條件**:75°C,20分鐘。3.**酶保存液成分**:25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**儲存條件**:-25~-15°C保存,有效期2年。5.**注意事項**:-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配對的突出末端,因而不適用于生成平齊末端。-25°C時BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性,是同溫度下Klenow片段(3'-5'exo-)的兩倍。6.**應用**:-隨機引物法標記。-cDNA第二條鏈的合成。-單個dA的加尾。-鏈置換的DNA合成。Ultra-Long Master Mix 是一種用于長片段PCR擴增的預混液,它含有經過特殊修飾的熱穩定Taq DNA聚合酶。Trizol (總RNA抽提試劑)

E1在ATP的存在下激發泛素分子,通過一個硫酯鍵將泛素的C末端甘氨酸殘基與E1酶的活性連接起來。磁珠法PCR/DNA純化試劑盒

Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease,簡稱λExonuclease)是一種具有特定特性和應用的酶,以下是其主要特點和應用:1.**特異性作用**:λExonuclease是一種5'→3'核酸外切酶,能選擇性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。2.**酶切活性**:對單鏈DNA和5'端未磷酸化修飾的DNA的酶切活性較低,不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。3.**嗜磷酸性**:該酶具有非常強的嗜磷酸性,磷酸化的核酸鏈與非磷酸化的核酸鏈的切割效率相差達200倍以上。4.**切割效率**:Lambda核酸外切酶是一種具有高度持續性的堿性核酸外切酶,可以連續地將核酸切割成為單個堿基,切割比較高速率可以達到1000nt/S。5.**應用領域**:-生成單鏈PCR產物用于DNA測序。-DNA單鏈構象多態性(SSCP)分析。-滾環擴增。-從雙鏈DNA片段生成單鏈DNA。-PCR產物的克隆。-質粒制備凈化。6.**酶活性定義**:Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoproduce10nmolofacid-solubledeoxyribonucleotidefromdouble-strandedsubstrateinatotalreactionvolumeof50μlin30minutesat37oCin1XLambdaExonucleaseReactionBufferwith1μgsonicatedduplex[3H]-DNA。磁珠法PCR/DNA純化試劑盒

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