固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)小白菊內(nèi)酯的菌種篩選創(chuàng)新突破了傳統(tǒng)局限。從菊科植物根際土壤中分離得到一株產(chǎn)小白菊內(nèi)酯的內(nèi)生 Alternaria sp.，通過紫外誘變結(jié)合高通量篩選，獲得高產(chǎn)突變株 UV-43，其固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)量達(dá) 185mg/kg（以麩皮為基質(zhì)），較原始菌株提升 4.2 倍。創(chuàng)新性優(yōu)化發(fā)酵基質(zhì)配方，添加 5% 的菊芋粉作為碳源，結(jié)合 3% 的酵母提取物，使發(fā)酵體系的 C/N 比維持在 25:1，促進(jìn)產(chǎn)物合成。采用淺盤發(fā)酵與通氣調(diào)控結(jié)合，控制基質(zhì)含水率 60%、溫度 28℃、通氣量 0.5vvm，使批次間產(chǎn)量變異系數(shù)＜8%。該固態(tài)發(fā)酵工藝的原料成本為植物提取法的 1/5，已在 200kg 規(guī)模生產(chǎn)線實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定生產(chǎn)。小白菊內(nèi)酯可通過影響細(xì)胞骨架，改變細(xì)胞形態(tài)和功能。安康小白菊內(nèi)酯廠家直供

合成生物學(xué)將在小白菊內(nèi)酯的未來發(fā)展中發(fā)揮性作用。通過對(duì)微生物代謝途徑的精細(xì)設(shè)計(jì)與重構(gòu)，科學(xué)家能夠構(gòu)建高效的 “細(xì)胞工廠” 來生產(chǎn)小白菊內(nèi)酯。目前，利用酵母細(xì)胞合成小白菊內(nèi)酯已取得一定進(jìn)展，未來將在此基礎(chǔ)上深入優(yōu)化。一方面，通過理性設(shè)計(jì)和定向進(jìn)化技術(shù)，進(jìn)一步優(yōu)化微生物中參與小白菊內(nèi)酯合成的關(guān)鍵酶的活性和穩(wěn)定性，提高其催化效率 3 - 5 倍。例如，對(duì)負(fù)責(zé)合成前體物質(zhì)的酶進(jìn)行改造，使其對(duì)底物的親和力提高，從而增加前體供應(yīng)，為小白菊內(nèi)酯的合成提供充足原料。另一方面，通過調(diào)控微生物細(xì)胞內(nèi)的代謝網(wǎng)絡(luò)，平衡能量供應(yīng)和物質(zhì)合成，減少副產(chǎn)物生成，將小白菊內(nèi)酯的產(chǎn)量提高至克級(jí)水平，達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)可行性。此外，隨著合成生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，未來有望開發(fā)出全新的微生物底盤細(xì)胞，專門用于小白菊內(nèi)酯的高效合成，進(jìn)一步提升生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量。安康小白菊內(nèi)酯廠家直供作為植物源成分，小白菊內(nèi)酯在醫(yī)藥界嶄露頭角。

小白菊內(nèi)酯的生產(chǎn)目前以植物提取為主，全球年產(chǎn)量約 500kg，主要生產(chǎn)企業(yè)分布在歐洲、中國(guó)和美國(guó)。歐洲以德國(guó) Schwabe 公司為，采用規(guī)范化種植的小白菊為原料，通過乙醇提取和樹脂純化生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)提取物（含小白菊內(nèi)酯 0.2-0.5%），主要用于保健品和非藥。中國(guó)企業(yè)在高純度產(chǎn)品（98% 以上）生產(chǎn)方面具有優(yōu)勢(shì)，采用超聲輔助提取結(jié)合 HSCCC 純化工藝，成本較歐洲低 30-40%，年產(chǎn)能約 200kg，主要供應(yīng)醫(yī)藥研發(fā)機(jī)構(gòu)。市場(chǎng)應(yīng)用中，保健品領(lǐng)域占比比較大（60%），用于偏和關(guān)節(jié)保健；醫(yī)藥研發(fā)領(lǐng)域占 30%，聚焦于炎癥和藥物開發(fā)；化妝品領(lǐng)域占 10%，利用其特性開發(fā)敏感肌護(hù)理產(chǎn)品。2023 年全球市場(chǎng)規(guī)模約 3.5 億美元，預(yù)計(jì)未來 5 年以 15% 的年增長(zhǎng)率增長(zhǎng)。

小白菊內(nèi)酯抗活性的發(fā)現(xiàn)是其研究領(lǐng)域的重要拓展。2005 年，美國(guó)約翰?霍普金斯大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)報(bào)道小白菊內(nèi)酯對(duì)白血病細(xì)胞的殺傷作用，在 1μM 濃度下可誘導(dǎo) 90% 以上的 Jurkat 細(xì)胞凋亡，而對(duì)正常造血細(xì)胞毒性較低（IC??=25μM）。后續(xù)研究證實(shí)其對(duì)多種實(shí)體瘤有效，包括乳腺、肺、結(jié)腸等。抗機(jī)制研究顯示，小白菊內(nèi)酯具有多靶點(diǎn)特性：通過抑制 HDAC 酶活性（IC??=3.5μM）誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化； p53 通路促進(jìn)凋亡；阻斷血管生成（抑制 VEGF 表達(dá)）。2018 年，發(fā)現(xiàn)其能選擇性干細(xì)胞（CD44 + 細(xì)胞），在乳腺模型中使腫瘤復(fù)發(fā)率降低 70%，這一發(fā)現(xiàn)為克服耐藥提供新策略。臨床前研究表明，小白菊內(nèi)酯與化療藥物聯(lián)用具有協(xié)同作用。與順鉑聯(lián)用可使肺細(xì)胞殺傷率提升 3 倍（CI=0.3），且減輕順鉑的腎毒性（血清肌酐水平下降 40%）。目前，小白菊內(nèi)酯衍生物的 Ⅰ 期臨床試驗(yàn)已完成（NCT04876321），顯示出良好的安全性和抗活性。小白菊內(nèi)酯能與細(xì)胞內(nèi)關(guān)鍵分子相互作用，影響細(xì)胞命運(yùn)。

小白菊內(nèi)酯在腫瘤免疫中的協(xié)同作用創(chuàng)新開辟了新方向。研究證實(shí)，其可選擇性微環(huán)境中的 M2 型巨噬細(xì)胞（IC50=12μM），同時(shí)促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟（CD86 + 細(xì)胞比例提升 2.1 倍）。與 PD-1 單抗聯(lián)合使用時(shí)，在 B16 黑色素瘤模型中，生長(zhǎng)抑制率從單藥的 45% 提升至 82%，且記憶性 T 細(xì)胞比例增加 3 倍，延長(zhǎng)荷瘤小鼠生存期。創(chuàng)新性開發(fā) “小白菊內(nèi)酯 - 免疫檢查點(diǎn)抑制劑” 共遞送系統(tǒng)，利用介孔二氧化硅納米粒同時(shí)負(fù)載兩種藥物，實(shí)現(xiàn)腫瘤部位的協(xié)同釋放。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，該系統(tǒng)使微環(huán)境中 IFN-γ 濃度提升 5.3 倍，Treg 細(xì)胞比例下降 60%，免疫原性細(xì)胞死亡標(biāo)志物 ATP 釋放量增加 4 倍。該策略為逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫抑制微環(huán)境提供了新思路，已申請(qǐng)國(guó)際發(fā)明專利。作為天然活性成分，小白菊內(nèi)酯受科研人員研究。寧德小白菊內(nèi)酯一公斤多少錢

作為天然產(chǎn)物，小白菊內(nèi)酯在炎癥、疾病研究中備受矚目。安康小白菊內(nèi)酯廠家直供

植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為小白菊內(nèi)酯生產(chǎn)提供了替代路徑。1987 年，美國(guó)科學(xué)家從小白菊葉片誘導(dǎo)出愈傷組織，但細(xì)胞中幾乎檢測(cè)不到小白菊內(nèi)酯（含量＜0.01%）。90 年代通過培養(yǎng)基優(yōu)化（添加茉莉酸甲酯作為誘導(dǎo)子），使細(xì)胞中含量提升至 0.1%，但仍未達(dá)到工業(yè)化要求。2005 年，日本學(xué)者采用細(xì)胞克隆篩選技術(shù)，獲得高產(chǎn)細(xì)胞系 TP-12，其小白菊內(nèi)酯含量達(dá)干重 0.5%，通過 5L 生物反應(yīng)器培養(yǎng)，產(chǎn)量達(dá) 0.12g/L。2012 年，中國(guó)科學(xué)院過程工程研究所創(chuàng)新開發(fā) “兩步法培養(yǎng)” 策略：第一階段（0-10 天）優(yōu)化營(yíng)養(yǎng)條件促進(jìn)細(xì)胞增殖，第二階段（11-20 天）添加 0.1mM 水楊酸誘導(dǎo)產(chǎn)物合成，使產(chǎn)量突破 0.3g/L。近年來，基因工程技術(shù)的應(yīng)用取得重大突破。2020 年，通過 CRISPR-Cas9 技術(shù)敲除細(xì)胞中的降解酶基因，產(chǎn)物積累量提升至 0.8g/L，接近天然植株水平。目前，500L 規(guī)模的植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)線已在江蘇投入運(yùn)行，年產(chǎn)能達(dá) 100kg，為原料供應(yīng)提供了穩(wěn)定保障。安康小白菊內(nèi)酯廠家直供