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云南模式動物模型構建

來源: 發布時間:2024-02-27

    四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型【方法】1、將大鼠隨機分配至2組中,每組5只,正常喂食喂水7d后進行試驗;2、大鼠體重為200g±10g,按組別給予藥物:生理鹽水組每只腹腔注射1ml生理鹽水、模型組每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各組藥物注射24h后取材進行相關檢測(注:注射前按比例混合四氯化碳:橄欖油=1:)【評定】給予四氯化碳后TP含量下降,ALT和AST含量上升【檢測】生理鹽水組肝索結構清晰,血管內無淤血,血管周圍無炎癥病灶,肝小葉結構清晰;給予四氯化碳后肝索排列紊亂,結構不清,存在大量壞死區域且肝索結構消失,有大小不一的空泡結構,多數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質,血管周圍有炎癥反應灶,少量紅細胞滲出;西維來司鈉介入后肝索排列不清晰,存在部分壞死區域且肝索結構消失,有大小不一的空泡結構,少數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質,血管周圍有炎癥反應灶,極少量紅細胞滲出。鹽酸阿霉素誘導心衰小鼠模型。云南模式動物模型構建

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    應根據所檢測指標的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學當道的現實背景下,動物實驗除了對實驗動物的體征及生理指標進行的監控外,各種分子檢測甚至是組學檢測也開始大行其道,動物實驗結束之后的機制研究成為了實驗的重頭戲。一般來說,動物實驗檢測對象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質,因此在取樣過程中應注意防止此類物質降解,在獲取后,應及時置于溫(≤-80℃)進行保存,在后續實驗過程中,也應當注意保存條件的穩定性,避免反復凍融。常用的方法便是酶聯免疫吸附測定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方法對各類生化指標及因子進行定性及定量檢測。(2)組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細胞質及細胞核進行染色標記,以觀察細胞變化。除此之外,許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應用,如利用Masson染色檢測組織纖維化病變,Nissl染色檢測神經元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測細胞衰老等。此外,還可以通過免疫組化技術對某些特異性標記物進行免疫顯色檢測,達到原位定性或定量檢測的目的。。

    進而使一些生長因子受體磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后,每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗證:幾周后,小鼠背部皮膚上出現色素沉著斑點。組織學研究表明,小鼠真皮組織中色素細胞積累,某些色素細胞表現出嵌套的形態學模式。缺點:化學誘導黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關性。另外,此類模型可用于研究陽光對黑色素細胞痔轉化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應用多的模型。應用:移植接種的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位發展、轉移的一些特點,多用于抗和轉移藥物評估。1同種移植模型同種移植模型是將小鼠黑素瘤細胞接種到具有相同遺傳背景的小鼠中獲得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。優點:同種移植模型具有免疫能力,可通過黑色素細胞與免疫細胞之間固有的相互作用來研究黑色素瘤與微環境的關系。小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。

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    動物的選擇目前常用的模式生物有果蠅、酵母、小鼠、斑馬魚等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分為誘發性模型、移植性模型、轉基因模型。一、誘導性模型應用:誘導的小鼠模型模擬人類受外界因素影響獲得的黑色素瘤,常用于研究預防黑色素瘤形成。1紫外線誘導的小鼠模型通過紫外線照射獲得的黑色素瘤模型被認為是臨床上可靠的模型。方法:有研究者將HGF/SFcDNA表達的小鼠置于日光燈下用不同劑量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)進行紫外誘導15min。模型驗證:誘導后的小鼠出現皮膚發紅,偶有淺表皮脫屑,在組織病理學中觀察到小鼠產生的大多數皮膚黑色素瘤中具有真皮成分,病變顯示具有垂直生長期或浸潤性惡性黑色素瘤以及淋巴結轉移,這些病變與人類患者黑色素瘤頁面狀擴散的表皮內病變特征相似。缺點:但野生型或正常型小鼠一般不易發生UV誘導的黑色素瘤,因此UV誘導的黑色素瘤小鼠模型往往需要聯合免疫缺陷小鼠,其操作技術較難、成本較高。2化學誘導化學致物誘導黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA誘導。DMBA是一種免疫抑制多環芳烴,其致機理是其活性代謝物被CYP450代謝成致物1,2-環氧化物-3,4-二醇DMBA,進而損傷DNA。TPA是通過蛋白激酶C充當啟動子。四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型。江蘇哪里有動物模型培養

它主要影響身體內的大中動脈,如冠狀動脈、頸動脈、腦動脈和腎動脈等,其發病機制的主要過程。云南模式動物模型構建

    brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統計結果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達;d:圖1中c的統計結果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結果;圖中:a:擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴增產物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結果;b:實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網膜中不再表達;sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應視網膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結果;圖中:a-c:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖a波統計。云南模式動物模型構建

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