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上海裸鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-26

    在人類疾病研究中數(shù)據(jù)表明,常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型按產(chǎn)生原因分為以下5類:自發(fā)性動(dòng)物模型、誘發(fā)型動(dòng)物模型、遺傳工程動(dòng)物模型、生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型和陰性動(dòng)物模型。下面上海研錄帶大家一起看看吧:1、自發(fā)性動(dòng)物模型:是指動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處理,在自然條件下或基因突變條件下所產(chǎn)生的疾病模型。主要包括突變型的遺傳病模型和近郊系的疾病模型。2、誘發(fā)型動(dòng)物模型:亦稱實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物模型。是使用物理、化學(xué)或生物致病因素誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生某些類似人類疾病表現(xiàn)而制備的動(dòng)物模型。此模型具有制備方法簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)條件容易控制,重復(fù)性好等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于藥物篩選、毒理、傳染病、病理機(jī)制的研究。3、遺傳工程動(dòng)物模型:是利用遺傳工程技術(shù)對(duì)動(dòng)物基因組進(jìn)行修飾,用于研究基因功能或疾病機(jī)制的動(dòng)物模型。也稱基因修飾動(dòng)物模型,是指利用胚胎工程和基因工程等生物技術(shù)有目的的干預(yù)動(dòng)物的遺傳組成,導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)新的性狀,并使其能夠有效地遺傳下去,形成新的可供生命科學(xué)研究的和其他目的所用的動(dòng)物模型。4、生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型:也是指利用健康生物的特定生物學(xué)特征,研究人類疾病相似表現(xiàn)得模型。這類動(dòng)物模型與人類疾病存在一定的差異,研究者應(yīng)加以比較,從中獲得有關(guān)材料。合理建立周圍性面癱動(dòng)物模型對(duì)進(jìn)一步深入研究具有重要意義。上海裸鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

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    把膜先用TBST泡洗兩遍再用5%脫脂奶粉或者BSA室溫封閉1-2小時(shí)。注意一定要讓蛋白面充分接觸封閉液。2、孵一抗脫脂奶粉封閉的話,要用TBST泡洗三遍再轉(zhuǎn)移至一抗溶液中,BSA封閉的可以直接轉(zhuǎn)移至一抗中。如果膜的寬(膜是一個(gè)長(zhǎng)方形,這里的寬與長(zhǎng)相對(duì)應(yīng))不大于8毫米,我習(xí)慣置于15毫升離心管中孵育,兩條膜"背對(duì)背"式放置于一個(gè)管子里(3毫升液體即可)。如果大于8毫米,就用普通的5格的一抗孵育盒(4毫升即可)。4度過夜,一般是12-18個(gè)小時(shí),注意放置水平,用搖床。內(nèi)參等蛋白豐度很高的如果孵久了可能出現(xiàn)條帶連在一起的情況,這時(shí)可以縮短孵育時(shí)間或者降低一抗的濃度。六、孵二抗顯影1、孵二抗室溫一個(gè)小時(shí)足矣。這步要注意的是建議用5%BSA或者脫脂奶粉稀釋二抗,這樣背景會(huì)干凈許多。也要注意膜的蛋白面要充分接觸二抗溶液,我們一般一條膜一個(gè)槽地孵。2、顯影這一步有個(gè)細(xì)節(jié)可能有些同學(xué)沒注意到,就是ECL發(fā)光液要與HRP反應(yīng)一分鐘后顯影效果才會(huì)更好,還有要注意的是顯影液要均勻覆蓋,一般第二次顯影(加新的顯影液)比一次好看。寧夏裸鼠動(dòng)物模型服務(wù)APOE-/-鼠左頸動(dòng)脈結(jié)扎糖尿病模型。

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    經(jīng)多級(jí)乙醇至水洗:二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min;4)蘇木素染色5分鐘,自來水沖洗;5)鹽酸乙醇分化30秒;6)自來水浸泡15分鐘;7)置伊紅液2分鐘。8)常規(guī)脫水,透明,封片:95%乙醇(i)1min→95%乙醇(ⅱ)1min→100%乙醇(i)1min→100%乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4個(gè)月時(shí),與ctrl(對(duì)照)小鼠比較,sixko小鼠的視網(wǎng)膜外核層已經(jīng)開始變薄,表明感光細(xì)胞死亡(圖7)。實(shí)施例5視網(wǎng)膜冰凍切片免疫染色:取4月齡的由實(shí)施例2得到的gm20541基因敲除純合子小鼠斷頸處死后,快速取眼球,并放入4%的pfa中,冰上固定15min后,在角膜上剪口,然后繼續(xù)冰上固定。2h后,pbs緩沖液沖洗3遍,然后將眼球置于30%蔗糖溶液中脫水2h,然后解剖鏡下剪去角膜及晶體,oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷凍。大約10min后,取出oct包埋的眼球,置于冰凍切片機(jī)-25℃平衡約30min后即可切片。切片厚度為12μm。切片完成后,選取質(zhì)量較高的片子于37℃烘箱放置30min,然后免疫組化筆在有視網(wǎng)膜組織的地方畫圈,pbs洗三遍以去除oct。

    可在設(shè)定的壓差標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)無極調(diào)控,以保障系統(tǒng)對(duì)海拔(3000m~7000m)的微負(fù)壓進(jìn)行模擬。并且,進(jìn)排風(fēng)風(fēng)管裝有高效空氣過濾器,使進(jìn)入飼養(yǎng)倉2的氣體潔凈。實(shí)施例3在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13連接,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉2內(nèi)的嵌入式氧測(cè)定儀。本實(shí)施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲(chǔ)備罐或者是液態(tài)惰性氣體儲(chǔ)備罐。在模擬低氧環(huán)境時(shí),外接惰性氣體儲(chǔ)備罐連接進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13。比例式氣閥和嵌入式氧測(cè)定儀均與功能控制面板19連接,通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調(diào)節(jié)比例式氣閥,通過加惰性氣體來來實(shí)現(xiàn)降低氧氣濃度。當(dāng)倉體內(nèi)的氧氣濃度較高時(shí),手動(dòng)打開惰性氣體儲(chǔ)備罐與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)之間的氣閥,調(diào)節(jié)惰性氣體進(jìn)入量,使倉體內(nèi)氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調(diào)整氣閥開度大小,達(dá)到需求的氧濃度,以此調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)高原缺氧環(huán)境的模擬。本技術(shù)方案采用的惰性氣體為對(duì)生命體無危害的惰性氣體。實(shí)施例4在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)。由于卵巢早衰的病因多種多樣,如自身免疫功能異常、遺傳因素、代謝因素、化療、放療及等。

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    17-高原濕度環(huán)境模擬裝置,18-動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元,19-功能控制面板。具體實(shí)施方式為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,以下結(jié)合附圖及實(shí)施例,對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實(shí)施例用以解釋本實(shí)用新型,并不用于限定本實(shí)用新型,即所描述的實(shí)施例是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實(shí)用新型實(shí)施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設(shè)計(jì)。因此,以下對(duì)在附圖中提供的本實(shí)用新型的實(shí)施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本實(shí)用新型的范圍,而是表示本實(shí)用新型的選定實(shí)施例。基于本實(shí)用新型的實(shí)施例,本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。需要說明的是,術(shù)語“”和“第二”等之類的關(guān)系術(shù)語用來將一個(gè)實(shí)體或者操作與另一個(gè)實(shí)體或操作區(qū)分開來,而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且,術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素。面神經(jīng)受損而致面部表情肌群的運(yùn)動(dòng)功能障礙,對(duì)患者的心理和日常生活造成很大的影響。江蘇外包動(dòng)物模型造模

建立SD大鼠頸動(dòng)脈損傷(結(jié)扎套管)模型。上海裸鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

    相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視力提高;(2)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視網(wǎng)膜外核層變厚;(3)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視網(wǎng)膜外節(jié)增長(zhǎng)。第四方面,本發(fā)明實(shí)施例提供了一種視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的繁育方法,其包括:將由如上所述的方法得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型進(jìn)行自交。在由方面所述的構(gòu)建方法得到了視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的基礎(chǔ)上,為了獲得更多的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,本領(lǐng)域技術(shù)人員容易想到直接將上述的構(gòu)建方法得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型進(jìn)行自交以繁育或培育出更多數(shù)量的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。附圖說明為了更楚地說明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案,下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹,應(yīng)當(dāng)理解,以下附圖示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例,因此不應(yīng)被看作是對(duì)范圍的限定,對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。圖1:檢測(cè)gm20541基因在不同組織中的表達(dá);圖中:a:rt-pcr檢測(cè)gm20541基因在不同組織的表達(dá)結(jié)果。上海裸鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

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