經(jīng)多級乙醇至水洗：二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸餾水洗2min；4)蘇木素染色5分鐘，自來水沖洗；5)鹽酸乙醇分化30秒；6)自來水浸泡15分鐘；7)置伊紅液2分鐘。8)常規(guī)脫水，透明，封片：95％乙醇(i)1min→95％乙醇(ⅱ)1min→100％乙醇(i)1min→100％乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3：1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4個月時，與ctrl(對照)小鼠比較，sixko小鼠的視網(wǎng)膜外核層已經(jīng)開始變薄，表明感光細(xì)胞死亡(圖7)。實施例5視網(wǎng)膜冰凍切片免疫染色：取4月齡的由實施例2得到的gm20541基因敲除純合子小鼠斷頸處死后，快速取眼球，并放入4％的pfa中，冰上固定15min后，在角膜上剪口，然后繼續(xù)冰上固定。2h后，pbs緩沖液沖洗3遍，然后將眼球置于30％蔗糖溶液中脫水2h，然后解剖鏡下剪去角膜及晶體，oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷凍。大約10min后，取出oct包埋的眼球，置于冰凍切片機(jī)-25℃平衡約30min后即可切片。切片厚度為12μm。切片完成后，選取質(zhì)量較高的片子于37℃烘箱放置30min，然后免疫組化筆在有視網(wǎng)膜組織的地方畫圈，pbs洗三遍以去除oct。通過截斷大鼠面部神經(jīng)致面癱模型的建立。外包動物模型構(gòu)建

    進(jìn)而使一些生長因子受體磷酸化。方法：有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后，每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗證：幾周后，小鼠背部皮膚上出現(xiàn)色素沉著斑點。組織學(xué)研究表明，小鼠真皮組織中色素細(xì)胞積累，某些色素細(xì)胞表現(xiàn)出嵌套的形態(tài)學(xué)模式。缺點：化學(xué)誘導(dǎo)黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關(guān)性。另外，此類模型可用于研究陽光對黑色素細(xì)胞痔轉(zhuǎn)化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統(tǒng)功能，因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應(yīng)用多的模型。應(yīng)用：移植接種的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位發(fā)展、轉(zhuǎn)移的一些特點，多用于抗和轉(zhuǎn)移藥物評估。1同種移植模型同種移植模型是將小鼠黑素瘤細(xì)胞接種到具有相同遺傳背景的小鼠中獲得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型，其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。優(yōu)點：同種移植模型具有免疫能力，可通過黑色素細(xì)胞與免疫細(xì)胞之間固有的相互作用來研究黑色素瘤與微環(huán)境的關(guān)系。寧夏哪里有動物模型骨質(zhì)疏松癥是以骨量減少及骨組織微觀結(jié)構(gòu)為特征的一種全身性骨骼疾病，伴有骨的脆性增加、易于發(fā)生骨折。

    然后5％的nds。含有％triton)封閉通透2h，孵育一抗，4℃過夜。第二天，pbs清洗三次后，孵育相應(yīng)的熒光二抗，然后再用pbs清洗三次，封片，觀察。結(jié)果見圖8，在小鼠4月齡時，通過視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn)，相較于野生型小鼠，gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短，表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上，可以看出，本發(fā)明實施例以小鼠為例，通過cre-loxp基因敲除技術(shù)，在小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中特異性敲除gm20541基因，小鼠表現(xiàn)出了視力受損，視細(xì)胞外節(jié)變短退化以及視細(xì)胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征。由此充分說明，在視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因，可以使目標(biāo)動物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性疾病。視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因的動物，可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網(wǎng)膜色素變性疾病研究等領(lǐng)域中，為該疾病的研究例如發(fā)病過程、機(jī)制以及相關(guān)藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發(fā)明實施例展示了在小鼠的視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因后的表型，但本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解到，小鼠作為哺乳動物的代表性動物，在其他的哺乳類動物中敲除gm20541基因或其同源基因也應(yīng)當(dāng)具有相似的表型。

    17-高原濕度環(huán)境模擬裝置，18-動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元，19-功能控制面板。具體實施方式為了使本實用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實施例，對本實用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例用以解釋本實用新型，并不用于限定本實用新型，即所描述的實施例是本實用新型一部分實施例，而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設(shè)計。因此，以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本實用新型的范圍，而是表示本實用新型的選定實施例。基于本實用新型的實施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本實用新型保護(hù)的范圍。需要說明的是，術(shù)語“”和“第二”等之類的關(guān)系術(shù)語用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區(qū)分開來，而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關(guān)系或者順序。而且，術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素。采用復(fù)合改良法造模,是目前 IgA 腎病中較為可靠、穩(wěn)定、成功率高,且病理、臨床指標(biāo)近人類 IgA 腎病的動物模型。

    酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常組大鼠自由飲水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease，AFL)模型組大鼠自由飲用酒精飲料，其酒精濃度從5%開始，每個濃度維持一周，依次改為10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%，以40%濃度持續(xù)至12周。3、在實驗過程中，各組大鼠均給以普通顆粒飼料，共持續(xù)為12周。4、第12，動物禁食12h，稱重，下腔靜脈取血處死，血液離心取上清備用?！緳z測】1、生化指標(biāo)檢測檢測ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、組織病理學(xué)酒精性脂肪肝模型組大鼠肝臟體積增大，明顯腫脹，包膜緊張，邊緣圓鈍，呈奶黃色，切面油膩，腹腔內(nèi)尤以有腹膜后脂肪堆積明顯。HE染色顯示，正常組肝臟內(nèi)無明顯脂肪變性，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞索圍繞靜脈呈放射排列。模型組肝臟彌漫大量脂肪變性，細(xì)胞體積增大，呈氣球樣變。3、標(biāo)志因子水平ELISA法測定血清中TNF-α和ApoB的含量。膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型。西藏大鼠動物模型服務(wù)

面神經(jīng)受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。外包動物模型構(gòu)建

    痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠，雄性，周齡6~8W，體重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，顱頂脫毛備皮；2、大鼠腦定位儀固定大鼠，顱頂正中切口，長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫；3、縫線將皮膚左右分開固定，前囟后10mm、矢狀縫左側(cè)；4、微量注射器移至開孔處修正骨孔，注射器垂直向顱內(nèi)插入，緩慢注射無水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球壓迫止血；5、縫合創(chuàng)口后維持25°體溫，等待蘇醒，觀察大鼠狀態(tài)?！居^察】術(shù)后3天模型大鼠攝食減少、右側(cè)肢體跛行、右前肢不負(fù)重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯，順時針繞圈前行，2周后癥狀減輕，大鼠于術(shù)后4周開始給予動物行為學(xué)觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現(xiàn)細(xì)胞水腫,排列不規(guī)則,結(jié)構(gòu)紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質(zhì)軟化灶和空囊形成,小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤,星形膠質(zhì)細(xì)胞肥大、增生等病理表現(xiàn)。曠場測試（OpenFieldTest）：實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內(nèi)，然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應(yīng)等。水迷宮測試。外包動物模型構(gòu)建