微波爐中融化后制成1％的瓊脂糖膠。取10μlpcr產物于加樣孔中，120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結果，wt表示野生型對照，條帶大小為223bp；het表示雜合子，有兩個條帶223bp和358bp；sixko表示純合子，條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3－cre鑒定結果。six3－cre大小為200bp。根據圖4中a的結果，顯示所采用的鑒定方法可對新生小鼠的基因型進行有效鑒定。其中，gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子)，并進行相關表型的驗證。(5)rt-pcr實驗分析six3-cre敲除小鼠視網膜中基因敲除效率驗證，方法如下：(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網膜組織，置于，加入1mltrizol提取液，室溫20分鐘；(b)加入200μl氯仿，充分混勻，室溫靜置10分鐘；(c)將樣品置于4度離心機，10000轉離心15分鐘；(d)小心吸取上清液，加入等體積異丙醇，充分混勻，10000轉離心沉淀rna；(e)75％乙醇清洗析出的總rna，離心再次沉淀，然后晾干加入depc水溶解；(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。大鼠、小鼠動物疾病模型技術。湖北動物模型飼養

    動物的選擇目前常用的模式生物有果蠅、酵母、小鼠、斑馬魚等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分為誘發性模型、移植性模型、轉基因模型。一、誘導性模型應用：誘導的小鼠模型模擬人類受外界因素影響獲得的黑色素瘤，常用于研究預防黑色素瘤形成。1紫外線誘導的小鼠模型通過紫外線照射獲得的黑色素瘤模型被認為是臨床上可靠的模型。方法：有研究者將HGF/SFcDNA表達的小鼠置于日光燈下用不同劑量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)進行紫外誘導15min。模型驗證：誘導后的小鼠出現皮膚發紅，偶有淺表皮脫屑，在組織病理學中觀察到小鼠產生的大多數皮膚黑色素瘤中具有真皮成分，病變顯示具有垂直生長期或浸潤性惡性黑色素瘤以及淋巴結轉移，這些病變與人類患者黑色素瘤頁面狀擴散的表皮內病變特征相似。缺點：但野生型或正常型小鼠一般不易發生UV誘導的黑色素瘤，因此UV誘導的黑色素瘤小鼠模型往往需要聯合免疫缺陷小鼠，其操作技術較難、成本較高。2化學誘導化學致物誘導黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA誘導。DMBA是一種免疫抑制多環芳烴，其致機理是其活性代謝物被CYP450代謝成致物1，2－環氧化物-3，4-二醇DMBA，進而損傷DNA。TPA是通過蛋白激酶C充當啟動子。西藏基因敲除動物模型實驗室四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型。

    通過無極調控微負壓裝置來調節飼養倉2內的壓力，通過高原低氧環境模擬裝置來調整飼養倉2內氧含量，當需要燈光時，通過高原光照環境模擬裝置15開啟紫外燈以及照明燈，通過高原溫度環境模擬裝置16來進行調溫，通過高原濕度環境模擬裝置17調節飼養倉2內濕度，通過動物行為學遠程觀察單元18可以監控動物的行為，飼養倉2內若干代謝籠3配備投料斗8、飲水瓶9可以進行攝食量、飲水量測定，聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12便于模型動物的尿液和糞便常規檢測，并且本系統設置的多個代謝籠3可以同時培養多種動物，造模動物多。實施例2在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述無極調控微負壓裝置包括進風系統13、排風系統14和霍尼威爾或西門子調控模塊，所述進風系統13設置在功能設備集成底座1內，所述排風系統14設置在飼養倉2頂部。本實施例的工作原理：本系統進風系統13內集成有進風風機單元、排風系統14集內成有排風風機單元。由于飼養倉2能夠密封，通過改變風機風量的方式來調節壓差，進風風機單元和排風風機單元均與飼養倉2連通，通過調節進、排風的壓力差值，系統內環境能夠形成(～)微負壓，系統配置霍尼威爾或西門子調控模塊。

    或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設備中還存在另外的相同要素。以下結合實施例對本實用新型的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例1本實用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，包括功能設備集成底座1和設置在功能設備集成底座1上的飼養倉2，所述飼養倉2具有無極調控微負壓裝置、高原低氧環境模擬裝置、高原光照環境模擬裝置15、高原溫度環境模擬裝置16、高原濕度環境模擬裝置17、動物行為學遠程觀察單元18，所述飼養倉2內設置有若干代謝籠3，飼養倉2前后箱體上設置有觀察窗4和若干操作窗5，飼養倉2左右箱體上分別設置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7，所述代謝籠3還包括設置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實施例的工作原理：本裝置的各個功能均通過設置在飼養倉2上的功能控制面板19控制，本裝置外形采用304不銹鋼，具有良好的氣密性。實驗動物送入飼養倉2內部后，關閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7，通過功能控制面板19實現飼養倉2內部環境模擬。小鼠腎纖維化（UUO）模型建立。

    視網膜外網層及其他相關細胞層出現相應病理改變。因此，視網膜前體細胞中的gm20541基因被敲除的動物可以作為視網膜色素變性疾病模型，用于視網膜色素變性性疾病研究等領域中，為該疾病的研究例如發病過程、機制以及相關藥物的篩選提供一種新的模型。進一步地，在本發明的一些實施方案中，敲除gm20541基因序列是指敲除gm20541基因的外顯子序列。敲除gm20541基因序列可以是敲除gm20541基因全長序列，也可以是敲除gm20541基因部分序列例如部分外顯子序列，無論敲除那種類型(部分或全長)的序列，只要是能夠在前體細胞中沉默gm20541基因的表達，使動物表現出視網膜色素變性性疾病相應特征即落入本發明的保護范圍。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述外顯子序列選自第1外顯子、第2外顯子、第3外顯子中的任意一個或多個外顯子序列。在本發明公開的內容基礎上，即在本發明揭示了gm20541基因與視網膜色素變性疾病的相關關系的前提下，本領域技術人員容易想到敲除gm20541基因的任意一個或多個外顯子序列，以使gm20541基因的功能受損，進而得到類似的視網膜色素變性疾病模型，此類方法，也是屬于本發明的保護范圍。進一步地，在本發明的一些實施方案中。可以克服人類某些疾病潛伏期長，病程長和發病率低的缺點。大鼠動物模型

通過截斷大鼠面部神經致面癱模型的建立。湖北動物模型飼養

    腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱：腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雌性4、實驗動物年齡：成年5、實驗動物體重：180~220g6、實驗動物環境：SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2015腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型15周詢價1、實驗方法：采用主動脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后，仰臥位固定、去腹毛、消毒，沿腹正中線切開皮膚及肌層，分離出腹主動脈，在腎動脈上方將腹主動脈與鈍頭8號探針一起結扎后，小心抽出針頭。手術造模后大鼠正常飼養3個月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計算心體比(VW/BW),并進行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進行病理學檢測.2、檢測標準：模型組大鼠VW/BW明顯增加，LVSP明顯降低，LVEDP明顯升高，±dp/dtmax則**減小，與正常對照組相比具有統計學差異。病理學檢測結果表明心肌出現典型心衰樣病理改變。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明：1、如有特殊要求，請另詢價。湖北動物模型飼養

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