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來源: 發(fā)布時間:2024-10-30

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實(shí)驗(yàn)簡介: 藥物研究包括吸收、分配、代謝、排泄和毒性等多個方面,而吸收是第一步。這個實(shí)驗(yàn)在以內(nèi)皮細(xì)胞通透性、藥物滲透等為研究方向的課題中很常用。 常見檢測細(xì)胞: 人結(jié)腸腺*細(xì)胞系 Caco-2、HT-29、Lovo、SW-480,人結(jié)腸上皮細(xì)胞 T84,狗腎上皮細(xì)胞系 MDCK,豬腎上皮細(xì)胞系LLC/PK1 等,主要模型為上皮細(xì)胞吸收、血腦屏障。 具體操作: 上皮細(xì)胞生長到細(xì)胞匯合度達(dá)80-90%時開始實(shí)驗(yàn),不要超過90%,否則會影響到后續(xù)細(xì)胞單層的形成。將細(xì)胞均勻接種在小室膜上。對于24孔板和96孔板的接種密度見本文圖示。青浦區(qū)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)咨詢問價上海益啟生物的細(xì)胞檢測試劑盒詢價公司電話。

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每隔2天用電阻儀測量細(xì)胞跨膜電阻值,直到達(dá)到平臺,提示細(xì)胞已經(jīng)形成致密單層;或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率,以判斷細(xì)胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細(xì)胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用。細(xì)胞單層匯合后,用DPBS清洗一次細(xì)胞,加入含有不同濃度藥物(一般10-200μM)的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運(yùn)輸效果,則上層小室中加藥物,下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液;反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)(60rpm震蕩或者不震蕩)1-2h,到達(dá)時間之后,分別從細(xì)胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液(一般50μL )轉(zhuǎn)移至新的轉(zhuǎn)運(yùn)分析板進(jìn)行LC/MC分析。對于放射性標(biāo)記藥物,分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液,通過多孔閃爍讀板儀讀值。益啟生物公司帶您了解添加劑詳情。長寧區(qū)干細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)代理價格

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