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來源: 發布時間:2022-03-17

疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液(10-0.63 ug)被轉移到Immobilon8-P膜上。印跡被阻止補充有0.5%脫脂奶粉(NFDM)的Tris緩沖鹽水含0.1%Tweeno 20表面活性劑(TBST),并用一級抗B-Tubulin進行探測(MAB3408)和次級HRP偶聯的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。維護SNAP i.d.o 2.0系統清理去除協議每次使用時應清潔SNAP i.d.o 2.0系統。清理去除鹽堿中的鹽或污染物和管道,抽吸真空并通過系統沖洗散去的水。注:請勿對SNAP i.d.9 2.0系統進行高壓滅菌。可以拆卸框架,并用中性清潔劑洗滌,然后用蒸餾水徹底沖洗。風干。要拆卸框架,請使用右側的藍色夾子調整框架的方質量有保障的超濾杯在哪里買您知道嗎?楊浦區MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器代理價

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潤濕印跡。,對于大多數應用和大多數抗體而言,0.5%的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意:請勿使用濃度高于0. 5%的干奶,因為它可能會導致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液,請參閱表5了解兼容性和推薦濃度。●在洗滌,封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1%Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力,并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統中的免疫檢測時間很短,因此建議在開始操作之前應準備一抗和二抗稀釋液。●MultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL,Mini blot固定器為5 mL,10 mL用于Midi印跡固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot為15毫升),以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。上海MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器哪家好上海益啟生物的細胞計數器詢價公司電話。

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關閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當的檢測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標準免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座上海益啟生物的聯系電話。

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體回收率差。 印跡大會和總議定書 1.用支撐層(藍色邊緣)握住吸墨紙托并弄濕膜層(白色)在潤濕過程中溢出水提供的托盤。不要弄濕支撐層。放置濕的滾動板上的污點固定器。2.如果需要,將印跡預先在甲醇和水中浸濕,然后將其放置在印跡支架中心,蛋白質面朝下。注意:印跡不得超過材料中指定的尺寸必填部分。3.輕輕滾動印跡以去除氣泡,然后稀釋印跡保持并滾動一次。4.打開吸墨紙固定框架,用力將吸墨紙固定在蛋白質面朝上,然后將其放入框架中。一個缺口吸墨架可確保正確放置在框架中。注意:如果只在框架中運行一個MultiBlot,請放置孔空白卡在第二口井中。5.關閉并鎖定框架。加入30 mL封閉溶液(MultiBlot為15毫升)。向下按框架并轉動系統旋鈕施加真空。當框架完全為空時,關閉真空。注意:如果使用抗體回收托楊浦區MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器代理價

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