免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有價值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的關鍵信息，包括：小規模蛋白純化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，細胞或組織中蛋白相對豐度和分布的測定。免疫沉淀分析法的成功取決于兩個主要因素：原始樣品中抗原的豐度和抗體對該抗原的親和力(一般需要108 M-1或以上的親和力)。在開始免疫沉淀之前，確保特定的步驟有適當的實驗對照。對照抗體在性質上盡可能與該特異性抗體類似。Upstate抗體哪家靠譜？徐匯區H3抗體抗體聯系電話

非特異性條帶 抗體（一抗或二抗）濃度過高 降低抗體濃度。 SDS可能引起對固定蛋白條帶的非特 轉膜后，振蕩洗滌 異性結合 在操作過程中不使用SDS。 條帶擴散 抗體（一抗或二抗）濃度過高 降低抗體濃度。 在凝膠上載入過多蛋白 減少蛋白上樣量。 黑色印跡，白色條帶， 抗體（一抗或二抗）濃度過高 減少抗體濃度，特別是HRP偶聯的二抗。 或信號快速減少 免疫沉淀 采用抗體-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法將特異性蛋白從細胞或組織裂解液中分離出來。浦東新區鑒定抗體抗體訂購上海益啟品牌抗體規格。

對于探索性研究，Western blotting仍是優先平臺，是用于評估新抗體和其它蛋白檢測分析 法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式細胞術和免疫組織化學）的標準。新技術的開發**減少Western blotting過程需要的時間（例如默克密理博的 SNAP i.d.? 2.0系統，目錄編 號SNAP2MM），提高了WB實驗的效率。 Western blotting的基本程序涉及下述關鍵步驟 樣本制備 凝膠電泳 轉膜 封閉非特異性結合 加入抗體 檢測 Western Blot 實驗流程圖 Troubleshooting 問題 可能的原因 處理方法

比較好將其保存于+4℃?？贵w上的熒光素較易感光淬滅。因此，熒光結合抗體應在 深色瓶中避光保存。長期保存時，某些抗體溶液可能產生不溶的成分。沉淀物可通過10000 g快速離心去除。 抗體的應用與優化 在19世紀末期，人們認識到了特異性抗體-抗原相互作用的價值，進而多種免疫技術問世，其中大多數目前仍在應用。從分析血液成分的沉淀素試驗，到高度特異性的染色質免疫沉淀技術，再到使用自動化成像流式細胞儀上進行的免疫染色實驗，以抗體為基礎的工具在生物學和生物醫學研究中一直起著重要的作用。上海益啟抗體批發價。

不均勻樣品，如混濁液、樣品中有顆粒節 樣品和標準品混勻不亮分移液器加樣不準 移液器在樣品和/或標準品使用時存在題留 在解育過程中試劑混合不充分洗滌不充分 液體蒸發 稀釋倍數的計算不正確修改實驗程序樣品處理不正確 處理辦法： 確保只使用特定批次的試劑進行實驗。 檢查所用的實驗稀釋度（按國說明書推薦的稀釋度進行實驗）檢查橫孔板分光光度i計中的渡長。 檢查在產品說明書中該批次的闡育時間。（酶底物的解育時間用于20-28℃范圍內）上海益啟生物的聯系電話。浦東新區鑒定抗體抗體訂購

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