建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義。現有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足，或與臨床實際病變部位有一定差距，如慢性坐骨神經結扎模型；或操作難度大，對動物損傷重，如自體髓核移植模型，選擇性神經根結扎模型。因此，急需一種新的操作簡單，重復率高，穩定且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術實現要素：為了建立一種操作簡單，穩定好且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型，本發明提供了一種大鼠慢性背根神經壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟：步驟一、麻醉大鼠；步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側或右側作縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌，暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔；步驟三、將壓迫元件插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中，得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。其中，步驟一具體為：腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后，將大鼠背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動物手術臺上，鋪無菌巾。在一個具體實施方式中，壓迫元件為l型棒；步驟三具體為：將2根l型棒的***端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中，l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。動物模型作為人類疾病的縮影。泰州提供疾病動物模型建模

1、動物模型名稱：淚腺摘除聯合新潔爾滅致干眼兔模型2、實驗動物種屬：新西蘭兔3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：2~3月齡5、實驗動物體重：1.8~2.5kg6、實驗動物環境：SPF級，1、實驗方法：摘除淚腺聯合新潔爾滅誘導。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯合肌肉注射進速眠新Ⅱ進行麻醉。麻醉后，進行淚腺摘除手術，眼瞼局部以75％酒精消毒，鋪洞巾，于眼下眶周部做一切口，小心分離皮膚、肌肉、筋膜，尋找到淚腺后完整摘除之，然后縫合創口。術畢，滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環素可的松眼藥膏，共7d。術后兔創口愈合后進行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液，2次/天，2滴/次，連續用藥14d。2、檢測標準：SchirmerI試驗淚液分泌減少，1%虎紅角膜染色試驗虎紅著色評分值高，角膜出現病理改變。青浦區C57小鼠疾病動物模型建模確定研究疾病目的了解影響疾病發生的內在與外在因素。

    圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明，而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g)，背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動物手術臺上，鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌至橫突上方，暴露腰4椎間孔，腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm，第二端12為2mm，直徑為，第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示，可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后，會對腰4神經根4起到壓迫作用；同樣的，當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后，會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的，制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。

    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡，平均體重20g)，46h后注射hcg，與雄性小鼠合籠交配，次日取受精卵進行顯微注射，將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內，產出小鼠，即f0代小鼠。上述步驟中grna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl，cas9蛋白購自newenglandbiolabs，貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr擴增產物測序，鑒定是否為嵌合體。本發明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應的擴增產物大小為，primers2對應的擴增產物為。用于f0代小鼠測序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。構建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇？

    得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。進一步地，l型棒的直徑為，***端長3-5mm，第二端長1-3mm。具體地，根據大鼠體重選擇l型棒的直徑大小：當大鼠體重在200g到不足220g范圍時，采用直徑為；當大鼠體重在220g到不足250g范圍時，采用直徑為；當大鼠體重在250g到不足300g范圍時，采用直徑為；當大鼠體重在300g到350g范圍時，采用直徑為。在另一個具體實施方式中，壓迫元件為u型棒；步驟三具體為：將u型棒的***端和第二端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中，得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。進一步地，壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內不會對神經造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個具體實施方式中，壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地，混合物為h62黃銅，即含銅量為％～％，余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中，壓迫元件采用聚乳酸(polylactic，pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料，其原料是乳酸，不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內，即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾，也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產生不良影響。可以簡化實驗操作和樣品收集。南京咨詢疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱：腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雌性4、實驗動物年齡：成年5、實驗動物體重：180~220g6、實驗動物環境：SPF級 1、實驗方法：采用主動脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后，仰臥位固定、去腹毛、消毒，沿腹正中線切開皮膚及肌層，分離出腹主動脈，在腎動脈上方將腹主動脈與鈍頭8號探針一起結扎后，小心抽出針頭。手術造模后大鼠正常飼養3個月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計算心體比(VW/BW),并進行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進行病理學檢測.2、檢測標準：模型組大鼠VW/BW明顯增加，LVSP明顯降低，LVEDP明顯升高，±dp/dtmax則***減小，與正常對照組相比具有統計學差異。病理學檢測結果表明心肌出現典型心衰樣病理改變。泰州提供疾病動物模型建模

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