技術(shù)領(lǐng)域：本發(fā)明屬于遺傳學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及pirb基因敲入的小鼠動物模型，還涉及上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。背景技術(shù)：鼠源成對免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb，pirb)，是人類免疫球蛋白樣受體b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2，lilrb2)的同源基因，pirb基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的7號染色體近端，總大小為，編碼841個氨基酸，目前鑒定出15個外顯子，外顯子1起始密碼為atg，外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本：)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白，包含由六個免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain，d)組成(d1-d6)的胞外段，一個疏水的跨膜段，三個免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs，itims)和一個itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講，pirb的分子量約為92kd，但是western-blot分析中，pirb經(jīng)常位于105kd處，因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn)，pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中，pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá)，包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹突細(xì)胞，但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識間的差距！浦東新區(qū)疾病動物模型建模供應(yīng)商

1、動物模型名稱：皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動物體重：160-200g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法：熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠，根據(jù)體重腹部備皮，然后固定于實(shí)驗(yàn)臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯，將紗布條浸入熱水中，待水溫恒定于99℃時，取出紗布，立即平鋪于待燙部位，于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷，致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：a.皮膚大體觀察：致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好，有少量紅褐**素沉著，皮膚輕微攣縮，表皮光滑；致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好，皮膚瘢痕形成，表面粗糙不平。鎮(zhèn)江面癱疾病動物模型建模上海東寰為您提供完善的小鼠動物疾病模型。

新華社上海4月9日電（記者張建松）利用先進(jìn)的基因編輯技術(shù)，我國科學(xué)家在***神經(jīng)性疾病的基礎(chǔ)研究方面，取得重要進(jìn)展。***在小鼠模型上，成功恢復(fù)長久性視力損傷小鼠的視力，同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學(xué)基金委、中國科學(xué)院、上海市的相關(guān)項(xiàng)目資助下，由中國科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)***創(chuàng)新中心（神經(jīng)科學(xué)研究所）、上海腦科學(xué)與類腦研究中心、神經(jīng)科學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室楊輝研究組完成的這項(xiàng)研究，通過基因編輯技術(shù)，成功誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞“變身”為神經(jīng)元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經(jīng)退行性疾病的***，探索了一個新的途徑。國際**學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》8日在線發(fā)表了相關(guān)研究論文。人類的神經(jīng)系統(tǒng)包含成百上千種不同類型的神經(jīng)元。在成熟的神經(jīng)系統(tǒng)中，神經(jīng)元一般不會再生，一旦死亡，就是長久性的。而神經(jīng)元的死亡，則會導(dǎo)致不同的神經(jīng)退行性疾病。在常見的神經(jīng)性疾病中，視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡導(dǎo)致的長久性失明和多巴胺神經(jīng)元死亡導(dǎo)致的帕金森癥尤為特殊，它們都是由于特殊類型的神經(jīng)元死亡所導(dǎo)致的。如何在成體中讓視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和多巴胺神經(jīng)元獲得再生？研究人員對小鼠模型的膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行了基因編輯。

圖2是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過具體的實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g)，背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動物手術(shù)臺上，鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌至橫突上方，暴露腰4椎間孔，腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm，第二端12為2mm，直徑為，第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示，可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后，會對腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用；同樣的，當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后，會對腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的，制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。

pcrmix：反應(yīng)條件：pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示，從圖3中可以看出，6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng)，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴(kuò)增出344bp的產(chǎn)物，而野生型沒有。pcr體系：反應(yīng)條件：(2)f1代小鼠測序：通過pcr擴(kuò)增后測序鑒定小鼠基因型，如圖4所示，為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子，切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下：步驟a、提取f1代小鼠尾部dna；步驟b、制備探針，通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。這類動物疾病模型是指各種疾病共同性的一些病理變化過程的模型。正規(guī)疾病動物模型建模

早期階段科學(xué)假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實(shí)驗(yàn)室研究。浦東新區(qū)疾病動物模型建模供應(yīng)商

1、動物模型名稱：角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動物體重：1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級。1、實(shí)驗(yàn)方法：角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼，再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒，以保持結(jié)膜清潔。開瞼，滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉，用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切，并滴入2滴氯霉素眼藥水潤洗，用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細(xì)眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮，術(shù)畢，滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。浦東新區(qū)疾病動物模型建模供應(yīng)商

上海東寰生物科技有限公司依托可靠的品質(zhì)，旗下品牌東寰生物以高質(zhì)量的服務(wù)獲得廣大受眾的青睞。是具有一定實(shí)力的商務(wù)服務(wù)企業(yè)之一，主要提供原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測試劑盒，動物疾病模型等領(lǐng)域內(nèi)的產(chǎn)品或服務(wù)。同時，企業(yè)針對用戶，在原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測試劑盒，動物疾病模型等幾大領(lǐng)域，提供更多、更豐富的商務(wù)服務(wù)產(chǎn)品，進(jìn)一步為全國更多單位和企業(yè)提供更具針對性的商務(wù)服務(wù)服務(wù)。公司坐落于上海市嘉定區(qū)興賢路1180號5幢2樓206室，業(yè)務(wù)覆蓋于全國多個省市和地區(qū)。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收，進(jìn)一步為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)、社會協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻(xiàn)。