ELISA試劑盒是一種用于檢測特定蛋白質、抗體或其他分子的試劑盒。ELISA是一種酶聯免疫吸附試驗,利用特異性抗體與抗原或特定分子結合,然后使用酶標記的二抗或底物來檢測結合事件。ELISA試劑盒通常包括抗體、底物、緩沖液、酶標記物等試劑,可用于醫學、生物學、生物技術等領域的研究和診斷。ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。北京Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。吉林ELISA試劑盒廠家價格
ELISA試劑盒的基本原理:ELISA即酶聯免疫吸附測定,ELISA試劑盒是基于這一原理開發的檢測工具。其原理是抗原與抗體的特異性結合:在試劑盒中,固相載體(通常為96微孔板)預先包被有特異性抗體或抗原,當包含有目標抗原或抗體的樣本加入后,會與預包被的物質發生特異性結合;然后加入酶標記的二抗或抗原,再次特異性結合形成復合物;加入底物,酶催化底物發生顯色反應,通過檢測吸光度值來確定祥本中目標物質的含量。這種原理使得ELISA試劑盒具有高度特異性和敏感性,能在復雜的生物樣本如血清、血漿、組織勻漿等中準確檢測微量的目標分子江蘇綜合ELISA試劑盒進貨價蘇州Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。
ELISA試劑盒中的封閉液是為了減少非特異性結合而使用的。在將抗原或抗體包被在微孔板后,微孔板表面可能還存在一些未被包被的活性位點。如果不進行封閉,在加入樣本或其他試劑時,這些位點可能會與樣本中的其他物質非特異性結合,從而干擾檢測結果。封閉液通常含有一些蛋白質,如牛血清白蛋白(BSA)或脫脂奶粉等。這些蛋白質可以與微孔板上的未被包被的活性位點結合,從而封閉這些位點,減少非特異性結合的可能性。正確使用封閉液并選擇合適的封閉時間和濃度,對于提高ELISA試劑盒檢測的特異性和準確性非常重要。
夾心ELISA試劑盒在檢測大分子抗原時具有獨特的優勢。它采用了雙抗體夾心法的原理。首先將捕獲抗體包被在微孔板上。然后加入含有待測抗原的樣本,抗原會與捕獲抗體特異性結合。接著加入檢測抗體,檢測抗體也是針對待測抗原的特異性抗體,但與捕獲抗體識別抗原的不同位點。檢測抗體與已經結合在捕獲抗體上的抗原結合,形成“抗體-抗原-抗體”的夾心結構。加入酶標記的二抗,二抗與檢測抗體結合,再加入底物進行顯色檢測。這種方法的靈敏度非常高,能夠準確檢測出低濃度的抗原。它特別適合于檢測蛋白質等大分子物質,在生物醫學研究和臨床診斷中,對于檢測細胞因子、等大分子生物分子的含量有著普遍的應用。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
ELISA試劑盒的操作相對簡便,這使得它在眾多實驗室和臨床檢測中得到廣泛應用。一般來說,試劑盒都配有詳細的操作說明書。首先,樣本的處理通常比較簡單,例如血液樣本只需進行離心等基本操作就可用于檢測。在檢測過程中,加樣步驟明確,按照微孔板上的標記依次加入樣本、試劑等。反應的時間和溫度也有明確規定,通常在常見的實驗室環境溫度下就可進行反應,反應時間也在可接受的范圍內,不需要特殊的長時間等待。顯色反應后的檢測也較為方便,使用酶標儀等常見儀器就可以讀取吸光度等數據。整個操作過程不需要復雜的儀器設備和高超的實驗技術,普通的實驗室人員經過簡單培訓就可以熟練操作。進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理品牌產品的性價比超高,一握伊麗薩的手。吉林好的ELISA試劑盒電話多少
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操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。吉林ELISA試劑盒廠家價格