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重慶垂直輪PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-06

產(chǎn)品特點(diǎn):PEIMAX40K是線(xiàn)性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線(xiàn)性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3.含更長(zhǎng)連續(xù)性乙烯亞胺片段,其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,以固體粉末形式提供,需用戶(hù)自行配置(詳情見(jiàn)使用方法)。或者關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bioPEI轉(zhuǎn)染試劑不含動(dòng)物源成分。重慶垂直輪PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn)。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限,被逼無(wú)奈只能放棄脂質(zhì)體2000,選擇PEI,以至于相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn):1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說(shuō)明書(shū),所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí),一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,順序不可錯(cuò),輕微混勻,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí),一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當(dāng)提高。PS:事實(shí)證明,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio,相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,后續(xù)購(gòu)買(mǎi)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,可咨詢(xún)上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!293細(xì)胞PEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染HEK293系列。

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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)Mine-bio

對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,后續(xù)購(gòu)買(mǎi)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!PEI轉(zhuǎn)染試劑從96孔板到1000L生物反應(yīng)器規(guī)模都能提供連續(xù)性的高表達(dá)蛋白或病毒。

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對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。Polysciences 是一家化學(xué)品制造公司,產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個(gè)科研領(lǐng)域。公司成立于1961年,起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案,幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,查看更多技術(shù)文章!PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染哪些細(xì)胞呢?湖北進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產(chǎn)品,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳原子,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。有實(shí)驗(yàn)證明,分子量為25000的線(xiàn)性PEI即Polysciences23966(PEI25K)轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良。產(chǎn)品特點(diǎn):適用于生產(chǎn)mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV);在HEK293、CHO和Sf9細(xì)胞系中高度有效;適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段;可預(yù)測(cè),可大規(guī)模生產(chǎn);兩周內(nèi)即可生成大量目標(biāo)蛋白或病毒;高轉(zhuǎn)染效率;大量已發(fā)表的文獻(xiàn)支持。重慶垂直輪PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

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