在基因工程的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們手中的重要工具,而ApaLI便是其中一位“精細(xì)刻刀”。它以其獨(dú)特的識別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。ApaLI的識別序列是“G^TGCAC”,這一序列在DNA中相對罕見,使得ApaLI能夠在特定位置進(jìn)行切割。它會在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得ApaLI在基因克隆和重組DNA構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢。在基因工程中,ApaLI的應(yīng)用極為廣。科學(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過DNA連接酶將切割后的基因片段與載體DNA連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而ApaLI的黏性末端特性正好滿足了這一需求。ApaLI的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察ApaLI對不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,ApaLI可以用來檢測基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。E2酶接收來自E1的激起泛素,并在E3酶的協(xié)助下將泛素分子轉(zhuǎn)移到靶蛋白上。Recombinant Mouse IL-16
重組人潛伏性TGF-β3蛋白(Recombinant Human Latent TGF-β3 Protein, His Tag)是一種重要的多功能細(xì)胞因子復(fù)合物,屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)超家族成員。TGF-β3與TGF-β1、TGF-β2同屬TGF-β亞型,廣參與胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、細(xì)胞分化及免疫調(diào)節(jié)等生理過程。潛伏性TGF-β3由成熟TGF-β3肽段與其潛伏相關(guān)肽(Latency-Associated Peptide, LAP)通過非共價鍵結(jié)合形成,是TGF-β3在體內(nèi)的主要存在形式,能夠維持其非活性狀態(tài),防止過早啟動。該重組蛋白通常采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如CHO細(xì)胞或HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,TGF-β3在胚胎發(fā)育、組織修復(fù)及免疫穩(wěn)態(tài)維持中具有獨(dú)特作用,其異常表達(dá)與發(fā)育異常、纖維化疾病及病進(jìn)展密切相關(guān)。因此,重組人潛伏性TGF-β3蛋白不僅是研究TGF-β信號通路的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價值。Recombinant Human N CadherinProtein,hFc Tag泛素化蛋白隨后被靶向到26S蛋白酶體進(jìn)行降解,或出現(xiàn)蛋白位置或活性變化。
Recombinant Human RGMa Protein(His-Avi Tag)是一種高純度、生物活性優(yōu)異的重組蛋白,專為神經(jīng)系統(tǒng)疾病機(jī)制與再生醫(yī)學(xué)研究設(shè)計(jì)。RGMa(Repulsive Guidance Molecule a)作為軸突導(dǎo)向的關(guān)鍵抑制因子,通過結(jié)合Neogenin受體調(diào)控神經(jīng)元生長錐塌陷,在脊髓損傷、多發(fā)性硬化等病理過程中扮演重要角色。該蛋白采用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),保留天然構(gòu)象與糖基化修飾,C端融合的His標(biāo)簽與Avi標(biāo)簽實(shí)現(xiàn)雙重功能:His標(biāo)簽便于通過Ni-NTA層析高效純化(純度≥95%);Avi標(biāo)簽則允許生物素定點(diǎn)標(biāo)記,適配基于鏈霉親和素的檢測平臺(如BLI、SPR),明顯提升相互作用研究的靈敏度與可重復(fù)性。實(shí)驗(yàn)表明,該蛋白在體外可劑量依賴性地抑制雞胚背根神經(jīng)節(jié)軸突延伸(IC50≈50 ng/mL),并可特異性阻斷Neogenin介導(dǎo)的RhoA啟動通路。此外,其內(nèi)素水平<0.1 EU/μg,滿足體內(nèi)應(yīng)用需求。作為神經(jīng)科學(xué)與藥物篩選的榜樣試劑,Recombinant Human RGMa Protein(His-Avi Tag)為解析抑制性信號網(wǎng)絡(luò)、開發(fā)促神經(jīng)再生療法提供了不可或缺的分子工具。
SERPINF2(α2-抗纖溶酶)是血漿中只有能不可逆抑制纖溶酶的內(nèi)源性絲氨酸蛋白酶抑制劑,其缺失導(dǎo)致罕見出血性疾病α2-AP缺乏癥。本品以HEK293真核系統(tǒng)表達(dá)全長成熟蛋白(aa 27-491),保留天然N-糖基化與活性中心,C端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni-NTA與肝素親和兩步純化,SDS-PAGE呈單一條帶,純度≥99%;內(nèi)素<0.01 EU/μg,可直接用于小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。功能驗(yàn)證顯示,其與纖溶酶1:1結(jié)合,二級速率常數(shù)k?=4.2×10? M?1s?1,100 nM即可完全抑制10 nM纖溶酶對熒光底物的水解;在尾靜脈剪斷模型中,0.5 mg/kg重組蛋白可將野生型小鼠出血時間縮短55%,對SERPINF2?/?小鼠實(shí)現(xiàn)完全止血。His標(biāo)簽兼容SPR、ELISA及表面等離子共振,可實(shí)時監(jiān)測與纖溶酶原、tPA的動態(tài)互作,助力α2-AP缺乏基因療法與溶栓藥物劑量優(yōu)化。該蛋白為解析纖溶調(diào)控網(wǎng)絡(luò)、開發(fā)出血與血栓雙向干預(yù)策略提供了高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究級試劑。還需要切割后的片段能夠完美匹配,而AflII的黏性末端特性正好滿足了這一需求。
在基因工程的微觀世界中,AciI酶猶如一位精細(xì)的“導(dǎo)航員”,為科學(xué)家們在復(fù)雜而浩瀚的基因海洋中指引著方向。它是一種限制性核酸內(nèi)切酶,憑借其獨(dú)特的識別序列和切割能力,成為現(xiàn)代替物技術(shù)中不可或缺的工具之一。AciI酶的識別序列是“CC^CAGAGG”,這一序列在DNA分子中相對罕見,使得AciI在切割過程中展現(xiàn)出極高的特異性。它會在識別到該序列后,精確地在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷,這種切割方式能夠產(chǎn)生黏性末端,為后續(xù)的基因重組提供了便利條件。在基因工程中,AciI酶的精細(xì)切割能力被廣泛應(yīng)用于基因克隆和重組DNA的構(gòu)建。科學(xué)家們可以利用AciI酶將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,就像從一座巨大的寶藏中找到那顆比較好珍貴的寶石。隨后,通過DNA連接酶,將切割后的基因片段與載體DNA連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。AciI酶的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察AciI酶對不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。這種染料能夠在PCR過程中實(shí)時監(jiān)測DNA的擴(kuò)增情況,通過熒光信號的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。Recombinant Mouse IL-16
中間的催化結(jié)構(gòu)域以及 C 端結(jié)構(gòu)域,這種多結(jié)構(gòu)域的組成使 Tn5 轉(zhuǎn)座酶能精細(xì)地與 DNA 相互作用并發(fā)揮其功能。Recombinant Mouse IL-16
重組人LAP(TGF-β1)蛋白(Recombinant Human LAP (TGF beta 1) Protein, His Tag)是轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)前體蛋白的潛伏相關(guān)肽(Latency-Associated Peptide)部分,是TGF-β1成熟過程中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。TGF-β1是一種多功能細(xì)胞因子,廣參與細(xì)胞增殖、分化、遷移、免疫調(diào)節(jié)及組織修復(fù)等生理過程。LAP通過與成熟TGF-β1非共價結(jié)合,維持其非活性狀態(tài),防止TGF-β1過早啟動。該重組LAP蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,LAP在調(diào)控TGF-β1啟動、維持免疫穩(wěn)態(tài)及促進(jìn)組織修復(fù)中具有重要作用。其表達(dá)異常與多種疾病密切相關(guān),如肺纖維化、肝硬化及自身免疫病。因此,重組人LAP蛋白不僅是研究TGF-β1啟動機(jī)制的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價值。Recombinant Mouse IL-16