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Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein

來源: 發布時間:2024-08-12

熒光探針法是一種利用熒光標記的分子(即熒光探針)來檢測和定量目標分子的方法。這種方法廣泛應用于生物化學、分子生物學和醫學診斷等領域。以下是熒光探針法的一些關鍵特點和工作原理:1.**熒光標記**:熒光探針是一類特殊的分子,它們含有可以發出熒光的化學基團(熒光團)。這些熒光團在受到特定波長的光激發時,會發出特定波長的光。2.**特異性結合**:熒光探針通常設計成能夠特異性地與目標分子結合,如DNA、RNA、蛋白質或其他小分子。這種結合通常是通過分子間的互補性,如氫鍵、疏水作用或離子鍵等實現的。3.**信號變化**:熒光探針在結合目標分子前后,其熒光特性(如熒光強度、波長、壽命等)會發生改變。這種變化可以是增強或減弱,取決于探針的設計和環境條件。4.**檢測原理**:-在**熒光共振能量轉移(FRET)**中,兩個不同的熒光團被設計成靠近,使得一個熒光團(供體)的能量可以非放射性地轉移到另一個熒光團(受體)。當供體和受體之間的距離改變(如由于目標分子的結合)時,FRET效率會改變,從而影響熒光信號。-在**熒光增強或減弱**中,探針的熒光特性直接受到其與目標分子結合的影響。例如,某些探針在結合DNA后,其熒光強度會增強。將合成的gRNA與Cas9 NLS蛋白混合,形成復合物。由于Cas9 NLS蛋白兩端都有NLS,有助于復合物快速進入細胞核。Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein,hFc Tag

Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein,hFc Tag,標準物質

在5'DNA腺苷酰化試劑盒中,"5'"表示DNA分子的5'端,即DNA鏈的起始端。DNA和RNA分子由核苷酸單元組成,每個核苷酸由一個糖分子、一個磷酸基團和一個含氮堿基組成。在DNA中,糖分子是脫氧核糖。這些核苷酸通過磷酸二酯鍵連接在一起形成多核苷酸鏈。DNA鏈有兩個端點,分別是5'端和3'端,這兩個端點是根據糖分子上碳原子的編號來命名的:-**5'端**(5'-phosphategroup):這個端點的磷酸基團連接在脫氧核糖的第五個碳原子上。-**3'端**(3'-hydroxylgroup):這個端點的脫氧核糖上第三碳原子上有一個自由的羥基(-OH)。5'DNA腺苷酰化試劑盒的目的是將腺苷酸(AMP)加到DNA分子的5'端,形成5'-磷酸腺苷鍵。這種修飾對于某些分子生物學應用非常重要,例如在RNA干擾(RNAi)、高通量測序、連接反應或PCR檢測中制備特定的接頭或適配體。在5'DNA腺苷酰化試劑盒中,通常包含一種酶(如腺苷酸化酶或某些RNA連接酶),它可以催化將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端磷酸基團上,從而完成腺苷酰化過程。Recombinant Cynomolgus LDLR Protein,His Tag牛痘DNA拓撲異構酶I具有解超螺旋的活性,可以解開雙鏈閉合環狀DNA的超螺旋結構,便于后續的酶切反應。

Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein,hFc Tag,標準物質

pA-Tn5轉座酶的高活性是其重要特性之一,這種高活性主要來源于以下幾個方面:1.**轉座酶突變體**:pA-Tn5轉座酶是由Tn5轉座酶的高活性突變體構成的。這種突變體相比野生型Tn5轉座酶,在體外的轉座效率顯著提高,通常提升1000倍以上。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉座酶將ProteinA與高活性Tn5轉座酶融合,這種融合不僅保留了Tn5轉座酶的高效DNA切割能力,還通過ProteinA的抗體結合特性,提高了對特定DNA序列的靶向能力。3.**轉座隨機性**:pA-Tn5轉座酶能夠在整個基因組上實現隨機的DNA切割,這為高通量測序提供了的覆蓋度。4.**穩定性**:高活性的pA-Tn5轉座酶在各種實驗條件下都能保持穩定,包括在不同的溫度和pH值條件下。5.**插入位點易測序**:pA-Tn5轉座酶產生的DNA片段具有明確的插入位點,這些位點容易被高通量測序技術識別和分析。6.**高效片段化**:在CUT&Tag等實驗中,pA-Tn5轉座酶能夠高效地實現目標蛋白結合DNA的片段化,為后續的測序和分析打下基礎。7.**低細胞投入量**:由于其高活性,pA-Tn5轉座酶允許從極少量的細胞中進行實驗,如單細胞水平的研究。

磁珠法質粒小量抽提試劑盒中的磁珠分離通常涉及以下步驟:1.**裂解細胞**:-首先,使用裂解液(含有SDS等成分)裂解細菌細胞,釋放出質粒DNA。2.**結合磁珠**:-將磁珠加入到裂解后的混合物中,磁珠表面通常修飾有能夠特異性結合核酸的配體,使得質粒DNA吸附于磁珠表面。3.**磁分離**:-將含有磁珠和質粒DNA的混合物置于磁分離架上。磁分離架產生磁場,使得磁珠迅速聚集在管壁或管底。4.**未結合物質**:-在磁珠固定后,小心移除上清液,避免擾動磁珠。上清液中含有未吸附的蛋白質、RNA和其他細胞碎片。5.**洗滌磁珠**:-向磁珠中加入洗滌液,輕輕混勻以去除殘留的雜質,然后再次使用磁分離架分離磁珠和洗滌液。6.**重復洗滌**:-根據試劑盒的說明,可能需要進行多次洗滌以確保高度純化。每次洗滌后都需洗滌液。7.**干燥磁珠**(如果需要):-在某些情況下,可能需要去除洗滌后的殘留液體,讓磁珠在磁場作用下干燥,但要注意不要使磁珠完全干燥,以免影響DNA的洗脫。8.**洗脫質粒DNA**:-使用洗脫液(通常是低鹽或高pH的緩沖液)將質粒DNA從磁珠上洗脫。洗脫液可以破壞磁珠與DNA之間的結合力,釋放DNA。。

FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA(dsDNA)靶標,其PAM序列為5'-TTN-3',與Cas9的PAM序列不同。

Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein,hFc Tag,標準物質

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一種用于合成互補DNA(cDNA)的試劑盒,它通過逆轉錄過程從信使RNA(mRNA)或總RNA模板合成cDNA的鏈。這類試劑盒通常包含逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的組分,以確保高效和準確的cDNA合成。RNaseH-表示該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性,這意味著在合成cDNA鏈的過程中不會發生RNA的降解,從而可以產生更高產量的全長cDNA,特別是從較長的模板(可達13kb)。該試劑盒通常包括以下組分:-逆轉錄酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTranscriptase,它通過點突變完全消除了RNaseH活性。-RiboLockRNaseInhibitor,這是一種重組蛋白,可有效保護RNA在高達55°C的溫度下不受RNases的降解。-緩沖液、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)和其他輔助成分,以支持cDNA合成反應。-有時還包括用于去除RNA樣品中污染的基因組DNA的DNaseI。合成的cDNA可以作為PCR或實時PCR的模板直接使用,也適用于第二鏈cDNA合成或線性RNA放大。此外,可以在cDNA合成過程中加入放射性或非放射性標記的核苷酸,以便在包括微陣列在內的雜交實驗中作為探針使用。利用牛痘DNA拓撲異構酶I的連接原理,可以在無需DNA連接酶的情況下,快速高效地連接DNA片段,實現克隆。MBP Ac(1-11)

牛痘DNA拓撲異構酶I具有特異性識別能力,能夠識別雙鏈DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列。Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein,hFc Tag

合成互補DNA(cDNA)的試劑盒是一種實驗室工具,用于從RNA模板通過逆轉錄過程合成DNA。逆轉錄是一種酶促反應,其中RNA模板被逆轉錄酶(一種特殊的DNA聚合酶)讀取,并根據RNA序列合成一條互補的DNA鏈。這個過程在分子生物學研究中非常重要,因為它允許科學家從RNA樣品中獲取遺傳信息,并進行進一步的分析和應用。cDNA合成試劑盒通常包含以下關鍵組分:1.**逆轉錄酶**:一種特殊的酶,能夠以RNA為模板合成DNA鏈。例如,M-MuLV反轉錄酶是一種常用的逆轉錄酶。2.**RNase抑制劑**:一種蛋白質,可以防止RNA樣品在實驗過程中被環境中的RNase酶降解。3.**緩沖液**:提供適宜的化學環境,保證逆轉錄酶的活性和反應的順利進行。4.**dNTPs**:四種去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP和dTTP),是合成DNA鏈的原料。5.**引物**:短的單鏈DNA或RNA基礎片段,用于啟動cDNA的合成。常見的引物類型包括oligo(dT)引物(針對mRNA的poly(A)尾)、隨機引物或特異性引物。6.**水**:通常是無核酸酶的水,以避免樣品被污染。Recombinant Human SLAMF6/NTB-A Protein,hFc Tag

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