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Recombinant Human MASP2 Protein

來源: 發布時間:2024-08-11

5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶通常被稱為腺苷酰化酶(Adenylase),這種酶能夠催化5'端磷酸化的單鏈DNA或RNA(pDNA或pRNA)轉換成5'端腺苷酰化DNA或RNA(AppDNA或AppRNA)。根據搜索結果,該酶的來源是嗜熱古細菌,在大腸桿菌中進行表達并純化而獲得。這種酶在反應中將ATP分解成AMP和PPi,然后將AMP轉移到單鏈DNA的5'磷酸基團上,形成腺苷酰化單鏈DNA,從而制備出腺苷酰化接頭(linker)。此外,一些5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶是MthRNA連接酶(例如NEB#M2611A),這種酶也用于生成高產量的5'腺苷酰化DNA,并且操作簡便,具有超過95%的效率,無需凝膠純化即可完成單步反應。MthRNA連接酶是一種已知能夠在65℃下有效工作的酶,有助于避免DNA的二級結構對腺苷酰化反應的干擾。這些酶的高效率和特異性使得5'DNA腺苷酰化試劑盒在單鏈DNA的5'端腺苷酰化修飾中非常有效,常用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測序建庫或PCR檢測等應用中。將合成的gRNA與Cas9 NLS蛋白混合,形成復合物。由于Cas9 NLS蛋白兩端都有NLS,有助于復合物快速進入細胞核。Recombinant Human MASP2 Protein,His Tag

Recombinant Human MASP2 Protein,His Tag,標準物質

PCR抑制劑是指那些在PCR反應中能夠干擾或阻礙DNA擴增的物質。這些物質通常來源于生物樣本本身或者樣本的收集和處理過程。以下是一些PCR抑制劑的特點:1.**多樣性**:PCR抑制劑可以是多種不同的化合物,包括膽酸鹽、尿素、血紅素、酚類化合物、蛋白質、多糖、植物或血液成分等。2.**來源**:它們可能來自血液(如血紅素)、尿液(如尿素)、糞便(如膽酸鹽)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化學物質(如酚類化合物)。3.**影響**:抑制劑可以影響DNA聚合酶的活性,干擾引物的退火,或與DNA模板發生非特異性結合,導致PCR擴增效率降低或特異性下降。4.**復雜性**:由于樣本來源的復雜性,不同的抑制劑可能需要不同的策略來克服。某些抑制劑可能通過物理方法(如離心、過濾)去除,而其他抑制劑可能需要化學處理或使用特定的PCR增強劑。5.**濃度依賴性**:抑制效果通常與抑制劑的濃度有關。在較低濃度下,某些抑制劑可能不會影響PCR,但隨著濃度增加,抑制效果會變得更加明顯。6.**特異性**:某些抑制劑可能對特定的DNA聚合酶或PCR體系有特定的影響。例如,一些抑制劑可能特別影響高GC含量的模板擴增。Recombinant Mouse Prolactin ProteinPfu DNA Polymerase 具有較高的保真度,能夠在DNA合成過程中減少錯誤摻入的堿基,降低非目標突變的發生率。

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dCTPSolution(脫氧胞苷三磷酸溶液)是一種分子生物學試劑,它是進行DNA合成反應的關鍵成分之一。dCTP與dATP、dGTP和dTTP一起,構成DNA聚合過程中所需的四種脫氧核苷三磷酸(dNTPs)。每種dNTP對應DNA中的一個堿基:腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鳥嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。dCTP的化學名稱是2'-脫氧胞苷-5'-三磷酸,它在DNA合成中起到以下作用:-**DNA合成**:在聚合酶鏈反應(PCR)和其他DNA合成過程中,dCTP作為底物,由DNA聚合酶催化,與DNA模板鏈上的鳥嘌呤(G)配對,形成新的DNA鏈。-**DNA測序**:在某些DNA測序方法中,dCTP可能用于標記或合成測序產物。-**分子克隆和其他技術**:dCTP在分子克隆、基因表達分析和其他涉及DNA合成的實驗中也有應用。dCTPSolution通常以高濃度(如100mM)的溶液形式提供,以便于在實驗中使用時進行稀釋。這種溶液需要在低溫(通常是-20°C)條件下儲存,以保持其穩定性和避免分解。在購買和使用dCTPSolution時,用戶應確保產品具有高純度、無PCR抑制劑、無核酸酶污染等特性,以保證實驗的準確性和重復性。此外,dCTPSolution應用于研究用途,不應用于臨床診斷過程。

pA-Tn5轉座酶是通過將ProteinA與Tn5轉座酶進行融合來構建的。ProteinA是一種來源于金黃色葡萄球菌的蛋白質,它具有高親和力結合大多數哺乳動物IgG抗體的Fc片段的能力。Tn5轉座酶是一種能夠識別特定DNA序列并在基因組上進行“剪切-粘貼”或“復制-粘貼”的酶。融合ProteinA的目的是為了在實驗中實現對特定蛋白質的靶向。下面是pA-Tn5轉座酶融合的一般步驟:1.**基因克隆**:首先,將Tn5轉座酶的基因和ProteinA的基因克隆到一個表達載體中。這通常涉及到分子克隆技術,如PCR擴增、限制性內切酶消化和連接酶連接。2.**融合蛋白設計**:設計一個融合蛋白,其中ProteinA的基因序列和Tn5轉座酶的基因序列通過一個短的連接肽(LinkerPeptide)相連。這個連接肽通常包含幾個氨基酸殘基,以確保兩個蛋白部分在融合后仍能保持各自的構象和功能。3.**表達載體構建**:將融合基因插入到適合的表達載體中,這個載體應該包含適當的啟動子、標記基因(如抗性基因)和終止子,以確保融合蛋白在宿主細胞中得到高效表達。4.**宿主細胞表達**:將構建好的表達載體轉化到宿主細胞(如大腸桿菌)中,通過誘導表達融合蛋白。在gRNA的引導下,Cas9 NLS可以對特定DNA序列進行剪切,適用于研究基因功能或進行基因編輯 。

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磁珠本身并不直接參與電泳過程,但它們可以用于電泳后的樣品處理,特別是在核酸(DNA或RNA)的提取和純化過程中。以下是使用磁珠進行電泳后樣品處理的一般步驟:1.**凝膠電泳**:-首先,將DNA或RNA樣品通過凝膠電泳進行分離。凝膠通常是瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠,根據樣品的大小和類型選擇合適的凝膠濃度和緩沖體系。2.**觀察和切割**:-電泳完成后,使用紫外線照射凝膠并使用適當的染料(如EB或SYBRGreen)對DNA或RNA進行染色,以在紫外光下觀察到DNA或RNA的條帶。3.**樣品提取**:-確定目標DNA或RNA條帶后,使用干凈的工具(如切割器或移液槍)從凝膠中切割出含有目標分子的凝膠片段。4.**磁珠準備**:-根據磁珠試劑盒的說明書,準備磁珠。通常包括磁珠的重懸和可能的表面修飾,以確保它們能夠特異性地結合目標核酸。5.**樣品與磁珠混合**:-將切割出的凝膠片段轉移到含有磁珠的溶液中,溫和地混合以促進磁珠與核酸的結合。6.**磁分離**:-將含有磁珠和核酸的混合物置于磁分離架上,利用磁場使磁珠快速聚集在管底,從而實現與溶液的分離。7.**洗滌**:-移除未結合的溶液,向磁珠上加入洗滌液,再次進行磁分離以去除雜質。Cas9 NLS可用于體外實驗中篩選能夠高效引導Cas9蛋白進行DNA剪切的gRNA序列 。Recombinant Human DLL4 Protein,hFc Tag

在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆,減少克隆過程中的非目標突變。Recombinant Human MASP2 Protein,His Tag

PCR預混合溶液是一種為聚合酶鏈反應(PCR)實驗預先配制好的混合試劑,它包含進行PCR所需的大部分或全部成分,除了特定的DNA模板、引物和可能的水之外。這種預混合溶液的設計旨在簡化實驗步驟,減少實驗過程中的誤差,提高實驗的重復性和效率。通常,PCR預混合溶液包含以下成分:-**DNA聚合酶**:負責在PCR過程中合成新的DNA鏈。-**dNTPs**(脫氧核苷三磷酸):是DNA合成的原料,包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP。-**緩沖體系**:提供適宜的pH和離子環境,保證DNA聚合酶的活性。-**Mg2+**:作為DNA聚合酶的輔助因子,影響酶的活性和PCR的特異性。-**穩定劑**:延長預混合溶液的有效期和穩定性。-**染料**(可選):如溴酚藍或類似物質,用于在電泳時觀察DNA條帶。PCR預混合溶液的使用可以減少實驗者在每次實驗時手動添加各種成分的需要,從而節省時間并降低污染的風險。此外,一些預混合溶液還可能包含其他添加劑,比如增強劑或保護劑,以提高PCR的效率和穩定性。Recombinant Human MASP2 Protein,His Tag

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