流式細胞術的特點：1、檢測對象：單細胞懸液或生物顆粒；2、檢測特點：單細胞水平分析；3、檢測參數：多參數熒光信號；4、檢測速度：高速，比較高達上萬個細胞/秒；5、檢測結果：精度高、準確性好；可以對目標細胞進行分選。分析型流式細胞儀：細胞樣本分析后再進入廢液桶，不能回收利用。分選型流式細胞儀：既能流式分析，還能對分析的目的細胞進行分選。進樣管道比較長，還需要保持無菌狀態，所以分選型流式細胞儀一般只用于分選。我們開發并驗證流式細胞術的倍性鑒定方法，用它來探索倍性比的季節性波動和影響該物種野生種群的環境因素。國產Sysmex倍性分析儀生命科學用品

CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀一機全能：1、特殊設計，專為醫學、農業科學、育種及水產養殖領域提供完美的倍性和周期解決方案2、配備365nm光源，高效激發DAPI染料，避免RNA的影響和次生代謝物的影響3、配備532nm光源，高效激發PI染料，激發效率遠超488nm和561nm激光器4、超高熒光分辨率， DNA檢測CV<1%，適合高精度倍性實驗。5、采用TVAC定體積相對計數功能，無需相對計數微球，隨時掌握樣本濃度6、樣本流速從0-20ul/s連續精確可調，適合極低濃度樣本的檢測7、可選配自動上樣器CyFlow Robby，兼容48孔板，96孔板和流式管，實現無人值守的高通量上樣8、結合配套植物倍性試劑，可在5min內完成植物倍性檢測實驗。9、支持樣本快速處理和檢測；10、基于PI和DAPI的熒光DNA分析；11、提供樣本快速處理試劑盒，用于 DAPI 和PI 標記的倍體分析；12、配套的儀器質控試劑；13、所有樣本的細胞核染色(包括 ，葉、根、愈合組織、懸浮組織、雜交細胞等)；14、可用于任何動物組織、培養細胞、懸浮細胞的倍體分析。倍性分析儀系統利用流式細胞儀快速檢測棉花 DNA 倍性，為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎數據。

提取高質量的細胞核用于倍性檢測至關重要，Peng 等比較了刀切法和研磨法提取棉花細胞核的效果，結果發現，刀切法提取的細胞核質量更高，因此我們選擇刀切法來提取棉花細胞核。根據其他植物材料已有的研究報道，植物取材需要考慮樣品易獲性、細胞核型的穩定性和保存性等因素。如果材料選取不當，會導致提取的細胞核顆粒較少，生成大量的雜質，甚至形成變異系數較大的 DNA 峰。本研究以棉花的老葉和嫩葉為材料制備樣品進行對比，結果表明棉花幼嫩葉片檢測效果好，完全可以作為倍性鑒定試材。

植物染色體倍性鑒定在植物遺傳育種中具有十分重要的作用。在育種過程中，通過花藥（花粉小孢子）、未受精子房等途徑再生出的植株，往往是單倍體、雙單倍體及其他倍性植株的混合群體，有效的倍性鑒定是了解其遺傳背景和進一步應用的基礎。多倍體育種是植物育種的一種途徑之一，它不僅可以對性狀進行改良，還可以提高植物體內各種有效成分的含量。利用倍性鑒定，準確地辨認多倍體并將其挑選出來，也是多倍體育種中的重要環節一環。另外，倍性鑒定也可用于分析細胞分裂活動等生理和遺傳研究。倍性鑒定特別是苗期倍性鑒定，不僅可以減少育種工作量，而且可以減少土地和資金的投入。國內外關于各種鑒定方法報道不少，但較分散。本文綜述了各種倍性鑒定方法并對其優缺點進行了評選。不同倍性植株在細胞學和形態解剖學上具有明顯差異，目前主要有兩大類型直接鑒定法和間接鑒定法。CyFlow Ploidy Analyser配合試劑盒，非常適合植物倍性檢測，兩 分鐘內即可出結果，明顯地縮短了實驗周期。

使用倍性分析儀,對48種培養多年不同基因型的柑橘愈傷組織的細胞DNA含量進行了測定.結果發現,除了路比葡萄柚、尾張和金諾橘等3種愈傷組織變異較小,未出現第二個峰以外,有93.8%的基因型的愈傷組織的細胞均出現了DNA含量加倍的細胞.通過DPAC分析軟件分析得知,鳳梨甜橙三倍體、寧波金柑、長沙橘、魯斯臍橙、國慶4號和卡特夏橙等6種愈傷組織的細胞DNA含量還出現了三倍增加及非整倍增加的現象.在待測的48種愈傷組織中,DNA含量變異細胞的百分率較大者為鳳梨甜橙三倍體,達18.51%;較小者為暗柳橙,為4.70%.通過鄧肯氏新復極差分析得知,不同基因型的DNA含量變異細胞的百分率之間存在差異明顯性.在相同繼代培養基和相同繼代周期的條件下,培養時間對愈傷組織變異大小影響不明顯。使用流式細胞術和成像流式細胞術分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報告基因。山東CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀配套試劑

高內涵成像和成像流式細胞術的出現近期彌合了流式細胞術和成像之間的差距。國產Sysmex倍性分析儀生命科學用品

擬南芥是一種生長迅速的小型植物，可進行范圍廣的核內復制，在不發生有絲分裂的情況下進行基因組擴增。該物種含有有花植物中較小的基因組，約157Mb，C值為0.321pg。這些特征使得擬南芥特別適合作為測定基因組大小的內參，并且可以用于儀器線性度的質量控制。用于流式實驗的植物樣品通常只需少量植物組織。使用標準手術刀片將植物組織切碎并浸泡于緩沖液中，過濾含植物細胞核的勻漿以去除大的碎片，用DNA特異性熒光染料進行標記，然后在流式細胞儀上采集數據，根據每個細胞核的熒光強度來計算DNA含量。通過與已知標準品比較，可以用熒光強度換算出DNA含量的相對值。擬南芥通常用作內參，只需將內參樣品和未知樣品的細胞核同時進行分離、染色和分析即可。國產Sysmex倍性分析儀生命科學用品

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