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來源: 發(fā)布時間:2023-08-17

為了分離外泌體,研究人員用兩個這樣的單元串聯(lián)構(gòu)建了一個裝置。首先,使用聲波從血液樣品中除去細(xì)胞和血小板。一旦細(xì)胞和血小板被去除,樣品進(jìn)入第二個微流體單元,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細(xì)胞外囊泡分開。這項工作的通訊作者之一,麻省理工學(xué)院材料科學(xué)與工程系科學(xué)家MingDao博士說:“聲波更溫和。而且在分離時,這些囊泡受處理的時間只有1秒鐘或更短。這是一個很大的優(yōu)勢。”使用該設(shè)備,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘。“這種新技術(shù)可以解決當(dāng)前外泌體分離技術(shù)的缺點,如周期長,一致性差,產(chǎn)量低,污染以及完整性受損等。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過程簡化為按一個按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡單。”研究人員們說。外泌體提取:聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀。貴陽正規(guī)外泌體提取試劑進(jìn)貨價

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研究中研究人員發(fā)現(xiàn),胃病細(xì)胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征,并促進(jìn)胃病細(xì)胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外,研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動。通過使用質(zhì)譜方法,研究人員確定載脂蛋白E(ApoE)是M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì)。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質(zhì),是決定胃病細(xì)胞遷移潛力的主要驅(qū)動因素。然而,來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細(xì)胞的外泌體在體外和體內(nèi)對胃病細(xì)胞的遷移沒有顯著影響。在機制上,M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體介導(dǎo)ApoE啟動的PI3K-Akt信號通路,并在TAM和受體胃病細(xì)胞之間進(jìn)行細(xì)胞間轉(zhuǎn)移,促進(jìn)細(xì)胞骨架的遷移。總的來說,該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細(xì)胞,促進(jìn)了胃病細(xì)胞的遷移。廈門正規(guī)外泌體提取試劑哪家好用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體,置于80℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

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功能:當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲。

industryTemplate活細(xì)胞分泌到胞外的囊泡樣小體,含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)。

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外泌體的提取的方式:1、免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實驗。2、PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。六是色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍。此提取方法條件復(fù)雜,成本高。廈門正規(guī)外泌體提取試劑哪家好

外泌體的提取方法,先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)。貴陽正規(guī)外泌體提取試劑進(jìn)貨價

用于外泌體提取的體液收集注意事項:1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻,避免劇烈搖晃。混勻后,將試管固定垂直放置于離心分離器,在頂部記錄抽血的準(zhǔn)確時間,因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比較穩(wěn)定的,若時間過長將導(dǎo)致外泌體數(shù)量增加。血小板極易因抽血時的物理因素而并釋放出外泌體,其中包括接觸、壓力、切力。2、抽血時間。除了血液黏度,體內(nèi)血液的各項指標(biāo)在1天中變化很大。生理節(jié)律會對血小板的產(chǎn)生很大的影響。白細(xì)胞的募集和循環(huán)系統(tǒng)中促炎細(xì)胞和細(xì)胞會隨時間變化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會隨時間變化。目前尚無設(shè)計較好的實驗對證實不同時間血液中外泌體的變化,故應(yīng)在相同的時間采集樣本。目前飲食是否會對EV產(chǎn)生影響尚未可知,但是由于脂蛋白可運載RNA且食物的攝取可以影響循環(huán)脂蛋白顆粒的類型、數(shù)量和作用,故抽血可在較后一次用餐后一段確定的時間進(jìn)行。貴陽正規(guī)外泌體提取試劑進(jìn)貨價

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