在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同，只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統得出量化的實時結果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀（qPCR儀）。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當只用一種熒光探針標記的時候，選用單通道，有多熒光標記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同目的基因片段的量。主要用于醫學臨床檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等機構。根據DNA擴增時升溫介質的不同可以將PCR儀分為：變溫鋁塊式PCR儀、水浴式PCR儀和變溫式流式PCR儀。1.變溫鋁塊式PCR儀熱源用電阻絲、導電熱膜、熱泵式珀爾帖半導體元件制作，讓帶有凹孔的鋁塊升溫，用自來水、制冷壓縮機或半導體降溫。優點：溫度傳導快，各管的擴增一致性好；反應管規格一致時無須外涂石蠟油；可用微電腦調節溫度轉換。 而核酸檢測方法中,PCR儀無疑是本次臨床檢測的關鍵利器。上海力康基因擴增PCR儀哪個牌子好

    一對引物的Tm值相差盡量不超過2～3攝氏度，同時引物和產物的Tm值也不要相差太大，20攝氏度范圍內較好。④引物的額外序列與退火溫度若有額外的序列信息要加到引物中，例如T7RNA聚合酶結合位點、限制酶切位點或者GC發夾結構可以使用加長的引物。一般說來，引物5’端添加無關序列不會影響引物特異序列的退火。有時候，引物中添加了大量與模板不配對的堿基，可以在較低退火溫度的條件下進行4到5個擴增循環；然后在假定引物5’端序列已經加入到模板中，計算得出的退火溫度下進行其余的循環。在引物上添加限制酶位點時一個重要的考慮是大多數限制酶的有效切割要求在它們的識別序列的5’端有2至3個非特異的額外堿基，這樣就會增加引物的非模板特異序列的長度。長引物序列的另一個缺點是影響溶解溫度的精確計算，而這對于確定PCR反應時的退火溫度又是必須的。對于低于20個堿基的引物，Tm值可以根據Tm=4(G+C)+2(A+T)計算。而對于較長的引物，Tm值需要考慮動力學參數、從“近鄰位”的計算方式得到，現有的PCR引物設計軟件大多數都采用這種方式。⑤引物的3’末端核苷酸組成引物3’末端和模板的堿基完全配對對于獲得好的結果是非常重要的。 上海力康實時定量PCR儀價格便宜PCR技術是支撐現代分子生物學發展的一塊重要基石。

    PCR（聚合酶鏈式反應）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°C左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合，再調溫度至DNA聚合酶適反應溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。PCR儀實際就是一個溫控設備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進行溫度控制。PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應核酸擴增儀，是利用PCR(Polymerasechainreaction，聚合酶鏈反應)技術對特定DNA擴增的一種儀器設備，被運用于醫學、生物學實驗室中，例如用于判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復制以及親子鑒定等。

    1993年，美國科學家Mulis眾望所歸地獲得了諾貝爾化學獎，他所取得的成就是發明了PCR技術。PCR，中文譯為聚合酶鏈式反應，其實是一種DNA的快速擴增技術，其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”那樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用，可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。這種技術一問世，立刻引起了分子生物學研究的一場革命，人們利用這種轟動全世界的技術很快就把微觀領域的生物學研究地往前推了一步。可以這么說，PCR技術使分子生物學研究一下子獲得了突破，而且隨著PCR技術的日趨完善，PCR在人類社會生活中的應用也越來越。比如說在“DNA指紋”中我們提到，科學家們只需要一根頭發甚至一個細胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作，這里實際上就要采用PCR技術，因為一個細胞中的DNA含量實在太少了，人們根本不可能檢測到它的指紋；有了PCR技術就好辦了，通過PCR技術把這個細胞中的DN斷擴增1000萬倍，這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。再比如，在醫院里檢驗血液中的某種病毒，有時病毒量極少（例如病毒攜帶者），通過傳統的檢查方法費力又費時，這時PCR技術也許就可以幫上忙。可以先選定這種病毒DNA上的一段DNA，設計合適的引物DNA。 熒光定量PCR儀是以熒光染料或熒光標記探針偵測每次聚合酶鏈鎖反應（PCR）循環后產物總量。

1988年初，Keohanog改用T4DNA聚合酶進行PCR，其擴增的DN段很均一，真實性也較高，只有所期望的一種DN段。但每循環一次，仍需加入新酶。1988年Saiki等從溫泉中分離的一株水生嗜熱桿菌thermusaquaticus中提取到一種耐熱DNA聚合酶。此酶具有以下特點：①耐高溫，在70℃下反應2h后其殘留活性大于原來的90%，在93℃下反應2h后其殘留活性是原來的60%，在95℃下反應2h后其殘留活性是原來的40%。②在熱變性時不會被鈍化，不必在每次擴增反應后再加新酶。③提高了擴增片段特異性和擴增效率，增加了擴增長度。由于提高了擴增的特異性和效率，因而其靈敏性也提高。為與大腸桿菌多聚酶IKlenow片段區別，將此酶命名為TaqDNA多聚酶TaqDNAPolymerase。此酶的發現使PCR的被應用。 PCR的特點是能將微量的DNA大幅增加。上海高校科研PCR儀制造廠家

PCR也被應用于目標DNA的片段克隆，該技術被稱為 PCR 克隆。上海力康基因擴增PCR儀哪個牌子好

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