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國產(chǎn)基因擴(kuò)增PCR儀銷售電話

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-12-01

    基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn),其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法,應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,例如:特定基因的檢測和診斷,DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、親子鑒定及法醫(yī)物證,動(dòng)、植物檢疫,動(dòng)物及其衍生產(chǎn)品檢測,動(dòng)物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測,轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域并設(shè)有走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔的,各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū),擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。國產(chǎn)基因擴(kuò)增PCR儀銷售電話

    1993年,美國科學(xué)家Mulis眾望所歸地獲得了諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),他所取得的成就是發(fā)明了PCR技術(shù)。PCR,中文譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),其實(shí)是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù),其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣。PCR技術(shù)通過兩個(gè)短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個(gè)小時(shí)內(nèi)把特定的DNA量提高1000萬倍。這種技術(shù)一問世,立刻引起了分子生物學(xué)研究的一場革命,人們利用這種轟動(dòng)全世界的技術(shù)很快就把微觀領(lǐng)域的生物學(xué)研究地往前推了一步。可以這么說,PCR技術(shù)使分子生物學(xué)研究一下子獲得了突破,而且隨著PCR技術(shù)的日趨完善,PCR在人類社會(huì)生活中的應(yīng)用也越來越。比如說在“DNA指紋”中我們提到,科學(xué)家們只需要一根頭發(fā)甚至一個(gè)細(xì)胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作,這里實(shí)際上就要采用PCR技術(shù),因?yàn)橐粋€(gè)細(xì)胞中的DNA含量實(shí)在太少了,人們根本不可能檢測到它的指紋;有了PCR技術(shù)就好辦了,通過PCR技術(shù)把這個(gè)細(xì)胞中的DN斷擴(kuò)增1000萬倍,這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。再比如,在醫(yī)院里檢驗(yàn)血液中的某種病毒,有時(shí)病毒量極少(例如病毒攜帶者),通過傳統(tǒng)的檢查方法費(fèi)力又費(fèi)時(shí),這時(shí)PCR技術(shù)也許就可以幫上忙。可以先選定這種病毒DNA上的一段DNA,設(shè)計(jì)合適的引物DNA。 力康實(shí)時(shí)熒光PCR儀銷售廠家根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn),可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類.

    PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。苯西酮尿癥(PKU)是一種常染色體隱性遺傳病,患者因苯丙酸羥化酶轉(zhuǎn)化為酷氨酸,使苯氨酸及其代謝物在體內(nèi)大量蓄積,出現(xiàn)腦組損傷及不可逆性智力發(fā)育障礙。PKU患者出生時(shí)正常,新生兒一經(jīng)確診為PKU停止母乳喂養(yǎng)采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年,可使患者智力水平發(fā)展維持正常。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴,一般家庭難以承受,因此,施行產(chǎn)前診斷,防止患兒出生是比較好的選擇。PAH只在肝細(xì)胞中表達(dá),不能用血細(xì)胞,成纖維細(xì)胞、羊水、絨毛細(xì)胞進(jìn)行酶活性分析,只能進(jìn)行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失,而是以點(diǎn)突變?yōu)橹饕憩F(xiàn)形式,而且其突變位點(diǎn)很多。必須使用PCR擴(kuò)增結(jié)合,ASO,SSCP或使用擴(kuò)增片段長度多態(tài)性分析(AmpFLA)進(jìn)行檢測,這些技術(shù)都較復(fù)雜,檢驗(yàn)人員須經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)。

    3).無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及。而有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以100%的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當(dāng)厲害了。Nacia數(shù)字PCRNaica數(shù)字PCR系統(tǒng)——簡便、快速地完成3通道檢測Naica數(shù)字PCR系統(tǒng)是法國Stilla公司開發(fā)的下一代核酸定量技術(shù)。使用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片——Sapphire芯片作為數(shù)字PCR過程的耗材。樣品通過毛細(xì)通道網(wǎng)格以30,000個(gè)微滴的形式進(jìn)入2D芯片中,可稱作Crystal微滴。Naica數(shù)字PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)在芯片上實(shí)現(xiàn)。對(duì)微滴成像用以檢測包含擴(kuò)增片段的微滴。一步是對(duì)陽性微滴計(jì)數(shù)從而得到的核酸數(shù)量。Naica數(shù)字PCR,結(jié)合了強(qiáng)大的圖像分析技術(shù)和直觀可視的檢測功能,從而達(dá)到了數(shù)字PCR定量的置信水平,獲得的數(shù)據(jù)真實(shí)可信。 PCR實(shí)驗(yàn)室又叫“基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室”,根據(jù)規(guī)定需有生物安全柜等防護(hù)設(shè)備及熒光定量PCR儀等檢測設(shè)備。

    并含有能用于探針捕捉雜交實(shí)驗(yàn)的足夠信息。這一長度范圍的產(chǎn)物可以通過采用兩步擴(kuò)增循環(huán)方法得到,從而減少擴(kuò)增時(shí)間。其他PCR方法有不同的佳產(chǎn)物長度。例如,通過定量的RNA-PCR檢測基因表達(dá)時(shí),產(chǎn)物應(yīng)該足夠大以便構(gòu)成競爭性模板,這樣,產(chǎn)物和競爭物都能夠在凝膠上很容易的分辨出來。這些產(chǎn)物一般在250~750bp范圍內(nèi)。⑦補(bǔ)充說明若在cDNA序列內(nèi)找尋PCR引物,需特別注意兩點(diǎn):首先,盡力將引物和產(chǎn)物保持在mRNA的編碼區(qū)域內(nèi),因?yàn)檫@是生成蛋白質(zhì)的獨(dú)特序列,不像3’末端非編碼區(qū)域與許多其他mRNA有同源性;第二,盡力把引物放在不同的外顯子上,以便使RNA特異的PCR產(chǎn)物與從污染DNA中產(chǎn)生的產(chǎn)物在大小上相區(qū)別。若PCR的目的是克隆一個(gè)基因或cDNA的特異序列,產(chǎn)物的大小是根據(jù)具體應(yīng)用預(yù)選的。在這里,計(jì)算機(jī)程序可以提供關(guān)于期望區(qū)域側(cè)翼選擇引物對(duì)的信息。在選擇用來擴(kuò)增來自不同物種DNA的引物時(shí),應(yīng)避開mRNA的5’和3’末端非翻譯區(qū)序列,因?yàn)樗鼈兛赡軟]有任何的同源性。3.簡并引物設(shè)計(jì)①設(shè)計(jì)簡并引物時(shí),一定要檢查靶擴(kuò)增區(qū)域選定氨基酸遺傳密碼的簡并度。很顯然,我們期望選擇簡并度低的氨基酸,達(dá)到提高特異性的目的。②充分注意物種對(duì)于密碼子的偏好性。 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀廠家直供

PCR儀是分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的常規(guī)儀器。國產(chǎn)基因擴(kuò)增PCR儀銷售電話

普通PCR儀:一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀稱作傳統(tǒng)PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是用于簡單的、對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床、檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu)。

梯度PCR儀:一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度,通常有12種溫度梯度)的PCR儀稱作梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DN段,其適退火溫度是不同的,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣節(jié)約成本的同時(shí)也節(jié)約了時(shí)間。梯度PCR儀在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通PCR擴(kuò)增。主要應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣既節(jié)約時(shí)間,也節(jié)約成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu),檢驗(yàn)、檢疫等。 國產(chǎn)基因擴(kuò)增PCR儀銷售電話

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