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e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖b波統計；scotopicamplitude：暗光測定峰值；flashintensity：閃光強度；a-wave：a波；b-wave：b波。圖6：光適應視網膜電圖(erg)檢測結果；圖中：a-b：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖軌跡圖；c：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖a波統計；e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖b波統計；f：20cd·s/m2光強下gm205...

常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等），實驗儀器是否需要預約使用。如果需要外送生物公司檢測，需要提前聯系好商家，以及了解清楚樣本如何獲取，如何運輸。飼養動物及干預動物購買后需要將時間節點提前規劃好，比如，周需要做什么？測量體重？觀察飲食？測量需要的指標？中間有無特殊操作？比如灌胃、測量體重、做CT檢測、取血？……第幾周取材？取材需要哪些組織？預實驗方案就要提前設計清楚以上內容。取材及樣品準備取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管，WesternBlot和PCR所需要的樣本儲存條件。比如凍存管、EP管，是否需要冰塊？是否...

一種是用beta巰基乙醇打開蛋白質分子二硫鍵的，另一種是用DTT(二硫蘇糖醇)。兩者的作用是一樣的，但特點不一樣，前者更容易與氧氣反應，穩定性比后者差，如果在常溫下暴露在空中，前者只能維持24小時的活性，后者卻可以維持7天左右。所以該如何選擇?如果是蛋白樣品較少，跑幾次就可以用完的樣品，這時選擇beta巰基乙醇。如果樣品很多，計劃跑上幾十次的，優先選擇DTT,建議變性后分裝保存。二、SDS-PAGE凝膠配制1、配膠前準備首先強調一下，一塊好的膠是跑好蛋白的前提，所以這個環節也不容忽視。玻璃板的選擇，一種是1毫米厚度的，另一種是，這個厚度選擇也是有講究的，如果上樣體積小于10微升，優先選...

糖尿病足大鼠模型【目的】構建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉；2、試劑配制：1）檸檬酸納緩沖液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:檸檬酸mL；B液:朽檬酸三納2）STZ液配制:55mg/kg（避光，現配現用10min內注射)；3、糖尿病模型構建方法：1）大鼠術前禁食12h；2）按55ug/g注射.連續3天注射，對照組注射檸檬酸緩沖液，造模組注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射結束5天后空腹測血糖，血糖值高于12mmol/L選入實驗組；【方法】方法一：細菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時，后足背側注射l0ul金黃...

指明方向。盡管現在基因組學、轉錄組、蛋白質組等組學已經取得了非凡的突破，但人類對于組學的整體性和復雜性認識還是很初級，也就比開始高明那么一點點，對橫亙在組學和個體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實驗、觀察和歸納。當年山中伸彌找到誘導分化細胞核重編程（也就是IPSc技術）的四個基因，可不是用理論算出來的，是大海撈針般地從成百上千個轉錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質還是差別不大，這也是為什么分子生物學科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然...

四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型【方法】1、將大鼠隨機分配至2組中，每組5只，正常喂食喂水7d后進行試驗；2、大鼠體重為200g±10g，按組別給予藥物：生理鹽水組每只腹腔注射1ml生理鹽水、模型組每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各組藥物注射24h后取材進行相關檢測（注：注射前按比例混合四氯化碳：橄欖油=1：）【評定】給予四氯化碳后TP含量下降，ALT和AST含量上升【檢測】生理鹽水組肝索結構清晰，血管內無淤血，血管周圍無炎癥病灶，肝小葉結構清晰；給予四氯化碳后肝索排列紊亂，結構不清，存在大量壞死區域且肝索結構消失，有大小不一的空泡結構，多數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質，血...

進而使一些生長因子受體磷酸化。方法：有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后，每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗證：幾周后，小鼠背部皮膚上出現色素沉著斑點。組織學研究表明，小鼠真皮組織中色素細胞積累，某些色素細胞表現出嵌套的形態學模式。缺點：化學誘導黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關性。另外，此類模型可用于研究陽光對黑色素細胞痔轉化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統功能，因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應用多的模型。應用：移植接種的黑色素...

首先，預實驗必須要當做正式實驗來對待（態度要放端正，這是必須的）。預實驗的每一步都需要詳細規劃，多方籌謀。不論是實驗動物的選擇，還是檢測試劑的購買，都盡量和正式實驗統一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后，再去購買實驗動物。因為動物會長胖，長胖后給藥劑量就要增加，不僅多花錢，并且還容易影響實驗效果。筆者曾經提前將實驗動物買回，但因為特殊原因沒能購買到造模藥物，終只能忍痛割愛將動物贈送他人，白白虧了一筆血汗錢（那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖，沒辦法用作造模）。動物及試劑購買首先需要考慮：實驗動物品種、體重、性別、周齡（通常根據既往文獻報道可以獲得答案）、數量（需要考慮到實驗有一定...

可在設定的壓差標準內無極調控，以保障系統對海拔(3000m～7000m)的微負壓進行模擬。并且，進排風風管裝有高效空氣過濾器，使進入飼養倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源，所述惰性氣源與進風系統13連接，所述惰性氣源與進風系統13之間設置有比例式氣閥，還包括設置在飼養倉2內的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理：惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環境時，外接惰性氣體儲備罐連接進風系統13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接，通過功能控制面板19上的氧濃度...

首先，預實驗必須要當做正式實驗來對待（態度要放端正，這是必須的）。預實驗的每一步都需要詳細規劃，多方籌謀。不論是實驗動物的選擇，還是檢測試劑的購買，都盡量和正式實驗統一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后，再去購買實驗動物。因為動物會長胖，長胖后給藥劑量就要增加，不僅多花錢，并且還容易影響實驗效果。筆者曾經提前將實驗動物買回，但因為特殊原因沒能購買到造模藥物，終只能忍痛割愛將動物贈送他人，白白虧了一筆血汗錢（那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖，沒辦法用作造模）。動物及試劑購買首先需要考慮：實驗動物品種、體重、性別、周齡（通常根據既往文獻報道可以獲得答案）、數量（需要考慮到實驗有一定...

代謝組學的研究對象大都是相對分子量在1000以內的小分子物質，因此常用的血液樣本在取樣后，應小心操作，防止溶血，盡快分離出血清，分置于溫環境下保存。由于用于病理實驗的動物組織采集相對其他樣品的采集，操作更繁瑣，在處理過程中許多細節容易忽略，造成數據不完美（甚至不能用）。因此接下來將重點介紹組織樣品采集的注意事項及其固定。組織樣品采集注意事項組織應新鮮，操作時間盡可能短，否則細胞發生死后變化、自融及現象。是動物心臟還在跳動時采集，樣本取出后在5分鐘以內置于固定液內，避免長時間暴露在空氣環境中。組織塊盡量小而薄。組織塊的厚度以不超過5mm為宜，較為理想的厚度為2mm左右，主要目的是使固定液...

或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設備中還存在另外的相同要素。以下結合實施例對本實用新型的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例1本實用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，包括功能設備集成底座1和設置在功能設備集成底座1上的飼養倉2，所述飼養倉2具有無極調控微負壓裝置、高原低氧環境模擬裝置、高原光照環境模擬裝置15、高原溫度環境模擬裝置16、高原濕度環境模擬裝置17、動物行為學遠程觀察單元18，所述飼養倉2內設置有若干代謝籠3，飼養倉2前后箱體上設置有觀...

輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼，二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水，改善金環電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后，關閉暗紅光。可以先嘗試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測，確認一下信號的質量：如果雙眼的振幅出現了與預期不同的較大差異，建議再次檢查金環電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是，完成暗適應·s/m2光強檢測后，系統將自動打開背景光。同樣的，需要打開定時器，光適應10-15分鐘，再記錄。6經過光適應后，依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強...

指明方向。盡管現在基因組學、轉錄組、蛋白質組等組學已經取得了非凡的突破，但人類對于組學的整體性和復雜性認識還是很初級，也就比開始高明那么一點點，對橫亙在組學和個體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實驗、觀察和歸納。當年山中伸彌找到誘導分化細胞核重編程（也就是IPSc技術）的四個基因，可不是用理論算出來的，是大海撈針般地從成百上千個轉錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質還是差別不大，這也是為什么分子生物學科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然...

經多級乙醇至水洗：二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸餾水洗2min；4)蘇木素染色5分鐘，自來水沖洗；5)鹽酸乙醇分化30秒；6)自來水浸泡15分鐘；7)置伊紅液2分鐘。8)常規脫水，透明，封片：95％乙醇(i)1min→95％乙醇(ⅱ)1min→100％乙醇(i)1min→100％乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3：1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結果發現在4個月時，與ctrl(對照)小鼠比較，sixko小鼠的視網膜外核層已經開始...

疾病神經系統疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用（樣品篩選、IC50測定）大鼠強迫游泳試驗（大/小鼠，Noduls軟件、視屏分析）大/小鼠小鼠懸尾試驗（Noduls軟件、視屏分析）小鼠5-羥色胺增強試驗小鼠利血平誘導眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預見性刺激（CUMS）模型大鼠新環境進食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經細胞的保護作用（谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等）新生大鼠對SH-SY5Y細胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細胞抗驚厥育亨賓毒性增強...

根據gm20541的cdna序列設計引物：gm20541-cdna-f：5’-tcggtctcatcttcattccc-3'；gm20541-cdna-r：5’-ggaaggctctgttccggtat-3'；(g)以提取的cdna為模板，進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結果見圖4中b，可以看出，通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照，sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠；gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化，以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因...

根據gm20541的cdna序列設計引物：gm20541-cdna-f：5’-tcggtctcatcttcattccc-3'；gm20541-cdna-r：5’-ggaaggctctgttccggtat-3'；(g)以提取的cdna為模板，進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結果見圖4中b，可以看出，通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照，sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠；gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化，以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因...

所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物，對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dn...

小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴，引起輕微的血管擴張；用無菌手術刀、刀片或鋒利的剪刀，快速截斷小鼠尾尖1-2毫米。如果需要多次采，之后每次需截除2-3毫米；從尾部像尾尖方向按摩，增加血流；用采集血液；結束后，按壓傷口或使用止血劑來止血；每次量大約可達。小鼠眼球取血單手保定好小鼠；必要時剪掉小鼠胡須，防止污染血液；輕壓取血側眼部皮膚，使眼球充血突出；用彎頭鑷夾取眼球并快速在摘取；同時用左手中指輕按小鼠心臟部位，以加快心臟泵血速度；當血液流盡時，用脫臼法處死小鼠；大鼠眼眶取血先將小鼠進行麻醉，大鼠翻正反射消失時不在繼續麻醉；抗凝處理過的玻璃毛細采樣管，掰成2-3厘米長度；右手食指和拇指輕按眼眶兩側皮...

brain：腦組織；liver：肝臟；retina：視網膜，intestine：腸；muscle：肌肉；heart：心臟；kidney：腎臟；spleen：脾；b：圖1中a的統計結果；c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達；d:圖1中c的統計結果。圖2：gm20541基因敲除小鼠的構建路線；圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖3：中長距離pcr鑒定子一代鼠的結果；圖中：a：擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為；其中a2,3,6,9,10,b1為陽性；b：擴增3’端長臂使用引...

所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物，對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dn...

擴增產物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結果見圖3中b，擴增產物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得...

agtacacacactggagagaaaccctataaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacattactctccgaacacataaaggaacacacactgaagagaaaccctatgaatgtaaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaatacataaaagtacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtgg

e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖b波統計；scotopicamplitude：暗光測定峰值；flashintensity：閃光強度；a-wave：a波；b-wave：b波。圖6：光適應視網膜電圖(erg)檢測結果；圖中：a-b：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖軌跡圖；c：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖a波統計；e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖b波統計；f：20cd·s/m2光強下gm205...

實施例7在實施例6的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述動物行為學遠程觀察單元18包括coms高清圖像采集系統、數字視頻傳輸系統、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統。本實施例的工作原理：系統內配置coms高清圖像采集系統(支持icp/ip網絡通訊協議)、數字視頻傳輸系統、頻硬件解壓卡(usb或pci接口用戶自選)、視頻顯示系統(用戶自備)，保障了實驗過程中實時監控與實驗結束后操作過程的溯源。例如，在飼養倉2上方裝高精密攝像頭，搭載手機app，可360°監控動物的行為，并能實時錄像，圖像采集等，通過監控錄像來實現動物學行為觀察。以上所述為本實用新型的較佳實施例而已，并不用以限...

SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線栓直徑（體重250-300g）【方法】1、10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定，頸正中線切口，分離肌肉和筋膜，分離左側頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）和頸內動脈（ICA）。3、微動脈夾暫時夾閉頸內動脈（ICA），活扣結扎近心端頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）打雙結，在雙結中間剪開小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內動脈（ICA），用眼科鑷輕推拴線，以頸外動脈（ECA）和頸內動脈（ICA）分叉處為參考位置。5、栓線插入預刻深度，感到有阻力，說明栓線已到達腦中動脈（MCA）,打結固定栓線。6、血管外的栓線不要留...

指明方向。盡管現在基因組學、轉錄組、蛋白質組等組學已經取得了非凡的突破，但人類對于組學的整體性和復雜性認識還是很初級，也就比開始高明那么一點點，對橫亙在組學和個體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實驗、觀察和歸納。當年山中伸彌找到誘導分化細胞核重編程（也就是IPSc技術）的四個基因，可不是用理論算出來的，是大海撈針般地從成百上千個轉錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質還是差別不大，這也是為什么分子生物學科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然...

擴增產物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結果見圖3中b，擴增產物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得...

可在設定的壓差標準內無極調控，以保障系統對海拔(3000m～7000m)的微負壓進行模擬。并且，進排風風管裝有高效空氣過濾器，使進入飼養倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源，所述惰性氣源與進風系統13連接，所述惰性氣源與進風系統13之間設置有比例式氣閥，還包括設置在飼養倉2內的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理：惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環境時，外接惰性氣體儲備罐連接進風系統13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接，通過功能控制面板19上的氧濃度...