RIPA細胞裂解液

RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一，其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS，該緩沖液能夠從細胞質，膜和核蛋白質中提取蛋白質，并且與許 多應用相容，包括蛋白質分析，和蛋白質純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶，如果需要，可將酶添加到試劑中以防止蛋白質水解并維持蛋白質 的磷酸化狀態。一些蛋白激酶和其他酶可能對RIPA緩沖液的組分敏感，導致其活性降低。 在這種情況下，準備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。

注意事項：

1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。

2.裂解得到的蛋白樣品，含有較高濃度的去垢劑，不建議用Bradford 法測定蛋白濃度，可以選用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。

3.裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續實驗；如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續實驗。如果檢測一些常見的轉錄因子，例如NFKB、p53等時，通常不必進行超聲處理，就可以檢測到這些轉錄因子。 細胞增殖的方式及意義是什么？南京成纖維細胞增殖染色

上海儒安生物科技有限公司麗春紅染色液產品簡介：1.麗春紅(PonceauS)染色液可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulosemembrane)和醋酸纖維素膜(celluloseacetatemembrane)上的蛋白的檢測。麗春紅帶負電荷，可以與帶正電荷的氨基酸殘基結合，同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區相結合，從而形成紅色的條帶。2.麗春紅對蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸餾水，PBS或其它適當溶液洗去。3.本試劑盒使用方便，本底低，靈敏度較高，對蛋白的檢測下限是250納克。使用方法:1.將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗春紅染色液中，搖動3-5分鐘或更長時間，直至出現清晰條帶。對結果作適當記錄。2.用蒸餾水，PBS或其它適當溶液漂洗2-3次，每次3-5分鐘，去除麗春紅，進行后續的Western檢測。西安pcr檢測細胞增殖實驗細胞增殖有什么方法？

上海儒安生物科技有限公司轉膜液產品簡介：我們生產的Western轉膜液(WesternTransferBuffer)可以用于Western時濕法電轉膜，是一種快速效率高的特有配方轉膜液，效果較好。1、轉印快速——室溫轉膜，20-30分鐘內將蛋白轉移到印跡膜上。2、轉印效率高——產生熱量非常小，減少蛋白損失。配置靈活——配置1*轉膜液時加入無水甲醇、無水乙醇均可，效果沒有明顯差異，兼容性好。使用方法：1*快速轉膜液的配制(1000ml)：取100ml此產品+800ml去離子水+100ml甲醇。電轉儀的設置：一個轉印槽：電壓：110V,電流：400mA；二個轉印槽：電壓：140V，電流：700mA；100kD以下蛋白，膠濃度＜10%的，轉印時間20分鐘即可轉印完畢。100kD以上蛋白，膠濃度≥10%的，轉印時間30分鐘即可轉印完畢。

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