生物藥物生產過程中,DMEM 培養基扮演著關鍵角色。在單克隆抗體生產環節,科研人員利用 DMEM 培養基培養雜交瘤細胞,使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產方面,DMEM 培養基用于培養病毒抗原,如流感疫苗生產中,通過在 DMEM 培養基中培養流感病毒,獲取足夠的病毒抗原,進而制備出安全有效的流感疫苗。此外,一些重組蛋白藥物的生產也依賴 DMEM 培養基培養的細胞,這些細胞在培養基提供的營養環境下,高效表達出具有***價值的重組蛋白,為患者帶來希望。DMEM/F12培養基是在DMEM培養基的基礎上,添加F12培養基中更為豐富的營養成分。上海細胞培養基源頭廠家
1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富,培養效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。海南樣本細胞培養基生產產家MEM培養基含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,主用于貼壁細胞培養,修改后也可用于其他細胞培養。
III)細胞系的大規模連續培養。該培養基主要用于培養和維護鱗翅類衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒。IPL-41培養基基礎也以用于無血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。目前用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。針對***的細胞培養應用,我們提供多種組分的DMEM改良培養基。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產,例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。不含葡萄糖的培養基可以根據研究需要,隨意調節葡萄糖的濃度,方便快捷。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 RPMI RPMI 1640 培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。
Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對***的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。葡萄糖可以根據研究需要,隨意調節葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產,例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。 Fischer’s培養基不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。湖南DMEM細胞培養基批發廠
Ham’s F-10適合用于人二倍體細胞的培養,低血清條件下細胞的克隆化培養,及動物的原代細胞培養。上海細胞培養基源頭廠家
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。 上海細胞培養基源頭廠家
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