細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方。Leibovitz’s L-15培養基的緩沖系統由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統的碳酸氫鈉緩沖系統。黑龍江華晨陽細胞培養基批發
MEMα是一種改良的MEM培養基,與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養添加劑,可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似,連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應。 貴州RPMI-1640細胞培養基廠家直銷Eagle培養基由Harry Eagle在Eagle基本培養基(BEM)的基礎上發展而來的。
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已應用于各種正常細胞培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞,是培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。
DMEM 培養基在細胞毒性測試中發揮著重要作用。在評估藥物、化合物或化妝品對細胞的毒性影響時,將細胞置于 DMEM 培養基中,再加入待測試物質。科研人員通過觀察細胞在含測試物質的 DMEM 培養基中的生長狀態、形態變化、增殖能力以及細胞死亡情況等指標,判斷測試物質的細胞毒性強弱。比如,在新藥研發初期,利用 DMEM 培養基進行細胞毒性測試,可初步篩選出細胞毒性較低的藥物候選物,減少后期研發風險,為新藥研發的安全性提供重要保障。HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用的培養基之一。
可在血清含量低時用,適用于克隆化培養。F12適用于CHO細胞,也是無血清細胞培養基中常用的基礎細胞培養基。DMEM/F12細胞培養基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發無血清細胞培養基時的基礎細胞培養基。與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用合成培養基時必須加入一定量的天然培養基成分,以克服合成培養基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細胞活力,促進細胞增殖。針對不同的動物細胞,現已開發了多種商業化、個性化的低血清細胞培養基配方,營養成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養基(serumfreemedium,SFM)經歷了天然培養基、合成培養基后,無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養基,一般是在合成培養基的基礎上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。MEM α培養基是一種改良的MEM培養基,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。河南實驗細胞培養基供應商
DMEM/F12培養基是在DMEM培養基的基礎上,添加F12培養基中更為豐富的營養成分。黑龍江華晨陽細胞培養基批發
在細胞培養實驗里,DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后,應及時存放于 2-8°C 的環境中,低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度,確保其營養成分的穩定性。在使用前,需將培養基預熱至 37°C,模擬人體體溫環境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統,需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間,為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。黑龍江華晨陽細胞培養基批發
深圳市華晨陽科技有限公司是一家集基因檢測、分子診斷、干細胞研發生產銷售于一體的國家高新技術企業。公司擁有20多項**,部分專利已經轉化應用于市場。公司于2016在深圳沙井恒昌榮高新產業園建立新的GMP廠房及研發實驗室。產品主要應用于基因檢測、醫院、醫療機構、生物制藥、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、公安刑偵法醫等。近年來,公司不斷加大自主研發投入,積極引進人才和技術,并與國內外多家科研院所以及醫院有著緊密合作,促進產學研成果轉化。
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