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細胞外泌體原液的特點

來源: 發布時間:2023-12-07

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環系統,參與妊娠期間母胎界面的免疫調節、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調控,在正常妊娠過程維持中發揮重要作用。而很多妊娠并發癥,如子癇前期等胎盤功能紊亂相關疾病的發生,很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中,多步差速離心是制備外泌體的經典方法,該方法是根據外泌體的沉降系數差速離心將其分離出來,然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體,如樹突狀細胞、淋巴細胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質混雜其中,這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。外泌體可以直接進入受體細胞影響細胞功能。細胞外泌體原液的特點

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外泌體中存在著某些特定的蛋白質、脂質和多糖,基于抗原–抗體特異性識別和結合作用原理,可將外泌體從其他組分中分離出來。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯蛋白、上皮細胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原,而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹脂、膜親和過濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯免疫吸附法和磁珠法等。酶聯免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質,其結果用吸光度值表示,該方法可以快速分析已知表面生物標志物的表達,也可以瞬時讀出外泌體的產量和特異性。磁珠法多使用共價包覆鏈霉親和素的磁珠,與樣品一起孵育后可通過磁泳將被結合的外泌體從樣品組分中分離出來。鑒于微米級磁珠可賦予更大的接觸面積,該方法不jin具有高度特異性,還具有比超速離心更高的外泌體產率。湖南外泌體Dil有報導指出,外泌體內miRNA參與促進血管新生、抗癥性和促進膠原蛋白沉淀等一系列過程。

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在當代準確醫療的大趨勢下,外泌體的發現和研究為肺病的早期診斷和醫治提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發現和早期診療提供可靠依據。根據種瘤來源的外泌體在肺病的發發展和侵襲轉移過程中的作用及相關機制的研究,臨床醫療人員可以針對不同的患者制定合適的醫治方案,以達到改善肺病患者生存率,延長肺病患者生存時間的目的。但是,針對外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機制及信號通路等??偠灾饷隗w的研究有著廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發出能夠應用于肺病臨床診斷和醫治的有效措施,造福更多的患者。

外泌體作為疾病診斷標志物的潛在應用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統的技術突破,要將其用于臨床治理,外泌體的大規模工業化生產面臨很大的挑戰。外泌體(exosome)是細胞分泌囊泡(extracellularvesicles)的一種亞型,存在于生物體液中,并參與多種生理和病理過程。外泌體被認為是細胞間通信的一種新機制,允許細胞交換蛋白質、脂質和遺傳物質。過去,細胞分泌的外泌體一度被認為只是參與廢物排泄;現在,隨著高通量蛋白質組學和基因組學的發展,外泌體被寬泛認為是生物體內細胞間短距離和長距離交流的高度保守的途徑,這種細胞間通信對于正常細胞和瘤細胞都是非常重要的。PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測可高出10~100倍以上。

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外泌體的生物發生途徑主要包括三個關鍵的檢查點:ILV的形成,阻止MVEs的降解以及MVEs和細胞膜的融合,這三個檢查點都包含在內體相關的囊泡運輸過程中。RABGTPase定位到特定膜結構的表面,通過招募效應因子來調節相應膜結構的囊泡運輸,例如,在內體溶酶體運輸網絡中,RAB5調節早期內體的形成及相互融合;內體膜上RAB5到RAB7的轉換調節早期向晚期內體的轉變;RAB7調節晚期內體/MVEs與溶酶體的融合來降解ILVs;RAB27調節MVEs與細胞膜的對接和融合來釋放ILVs形成外泌體。內吞的膜蛋白,特別是受體酪氨酸激酶家族的表皮生長因子受體,定位到內體和MVEs,通過MVEs和溶酶體融合來進入溶酶體降解,此過程受多種RABGTPases和ESCRT復合體的調控。外泌體復雜的內容物被認為是疾病診斷的無創或微創生物標志物。湖南外泌體Dil

外泌體觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。細胞外泌體原液的特點

外泌體(exosome)是一種由活細胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結構的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細胞包含的生物活性物質,如DNA、miRNAs、mRNA、長鏈非編碼RNA(LncRNA)、酶、蛋白質和細胞代謝物等。外泌體在細胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對于外泌體的研究涉及包括瘤的發生和發展、侵襲轉移機制、瘤診斷標志物以及藥物傳遞系統等諸多方面。外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區分。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。細胞外泌體原液的特點

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