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腹水提取試劑盒原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-29

在血液和大多數(shù)體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測(cè)到外泌體。血液外泌體的檢測(cè)通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應(yīng)用價(jià)值。相較于血清中相關(guān)miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質(zhì)瘤診斷和預(yù)后的指標(biāo),特別對(duì)預(yù)測(cè)中流復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移具有價(jià)值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。腹水提取試劑盒原理

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外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷,成熟于多囊泡胞內(nèi)體,終于膜融合。細(xì)胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體(earlyendosome),在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下,早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體(multivesicularbodies,MVB),這個(gè)過程中這些腔內(nèi)小囊泡(intraluminalvesicles,ILVs)會(huì)裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子,泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合。隨后,這些小囊泡會(huì)被釋放到細(xì)胞外,稱為外泌體。外泌體是通過細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動(dòng)排除的物質(zhì),大小均勻,而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成,大小不均一。血漿外泌體tmt外泌體在化療藥物的促轉(zhuǎn)移過程中具有重要的作用。

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外泌體調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能,延長(zhǎng)毛發(fā)根部的囊生長(zhǎng)期,同時(shí)活化處于靜止期的毛發(fā)根部的囊,使其提前進(jìn)入新的生長(zhǎng)周期,實(shí)現(xiàn)了毛發(fā)的再次生長(zhǎng)。骨衰老小鼠注射外泌體試驗(yàn)證明:年輕血液中的外泌體同樣使衰老的組織重新煥發(fā)生機(jī)。來源于脂肪組織中的干細(xì)胞分泌一些信號(hào)分子和生長(zhǎng)因子,可以促使控制毛發(fā)根部的囊生長(zhǎng)周期的毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞進(jìn)行分化,向上遷移生成表皮細(xì)胞和皮脂腺,向下遷移生成毛母細(xì)胞。毛發(fā)根部的囊的生長(zhǎng)周期決定毛發(fā)的生長(zhǎng)周期,而毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能決定了毛發(fā)根部的囊的活躍程度,外泌體靶向調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的功能。

外泌體是新型治理劑,惡性瘤細(xì)胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對(duì)外泌體的質(zhì)譜研究發(fā)現(xiàn),惡性瘤細(xì)胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR),可以抑制宿主細(xì)胞α型干擾素(IFN-α)的產(chǎn)生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下,也為晚期病癥患者的治理提供一個(gè)新的策略和理論依據(jù)。除了瘤,外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關(guān)臨床試驗(yàn)也在世界范圍內(nèi)開展中。神經(jīng)細(xì)胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。

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Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);參與細(xì)胞之間的交流,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤,有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期,標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上。成都鼻腔灌洗液外泌體

與正常細(xì)胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目。腹水提取試劑盒原理

由于這些胞外囊泡(EV)與生理和病理狀況之間的關(guān)系,人們對(duì)EV的興趣呈指數(shù)增長(zhǎng)。EVs對(duì)新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細(xì)胞外囊泡(如外泌體和微泡),主要參與髓鞘膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間的相互信號(hào)傳遞從而促進(jìn)神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認(rèn)為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴(kuò)散的重要因素。這些細(xì)胞外囊泡功能為以前無(wú)法識(shí)別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細(xì)胞相互作用增加了新方式。腹水提取試劑盒原理

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標(biāo)簽: 外泌體提取試劑盒
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