外泌體的基本信息：1、外泌體的大小：外泌體的直徑約40-150nm。2、從研究上來(lái)講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。3、外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。4、外泌體的直接比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm。5、外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個(gè)，近乎于平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè)。6、外泌體的細(xì)胞源：人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體。7、外泌體具有異質(zhì)性，即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別。8、外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙、體液中。9、外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體。外泌體內(nèi)主要含有核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等，可作為疾病診斷標(biāo)記物、調(diào)控靶細(xì)胞功能、參與細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)等。唾液外泌體提取

PEG沉淀法分離外泌體：通常通過(guò)將無(wú)水聚合物，如聚乙二醇（PEG），與樣品混合來(lái)沉淀外泌體。PEG聚合物競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合水分子，增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力從而沉淀外泌體，然后通過(guò)離心分離外泌體。這種分離的方法快速，簡(jiǎn)便，可用于各種起始體積（從100μL到幾毫升）適合于各種研究和臨床設(shè)定。然而，這種方法缺乏選擇性，PEG聚合物不只會(huì)導(dǎo)致外泌體小泡沉淀，還會(huì)引起其他細(xì)胞外囊泡、細(xì)胞外蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)聚集體沉淀。因此，在使用這種方法之前，必須進(jìn)行樣品預(yù)處理，例如過(guò)濾或超速離心，以減少較終的外泌體制劑的污染。外泌體的品牌有哪些外泌體的提取分離方法：PEG-base沉淀法。

磁珠免疫法分離外泌體：將針對(duì)目的抗原的抗體通過(guò)生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面，然后將磁珠與樣品共孵育，使外泌體特異性結(jié)合到磁珠上形成磁珠-外泌體復(fù)合物，再用蒸餾水或者PBS沖洗，結(jié)尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體。該方法相對(duì)于ELISA的好處主要是，珠粒提供了更大的表面積來(lái)捕獲外泌體，從而提高了分離效率。此外，使用磁珠時(shí)，樣品起始體積沒(méi)有上限，而基于微孔板的ELISA分析的較大樣品體積為100μL，且ELISA洗脫雜質(zhì)時(shí)容易造成孔間交叉污染。當(dāng)將磁珠法與金標(biāo)準(zhǔn)外泌體分離方法進(jìn)行比較時(shí)，磁珠法可分離出更純凈的外泌體，特異性高、速度更快，并且不需要昂貴的儀器。另外，與其他分離方法（如超速離心或超濾）相比，磁珠法不影響外泌體形態(tài)。但是采用磁珠法時(shí)，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響。

ELISA與WB的原理一樣，在抗體包被的微孔板中加入待測(cè)樣品、封閉、一抗孵育，洗滌后加入酶標(biāo)待測(cè)物形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，徹底洗滌后加顯色劑并用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值，結(jié)尾用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算外泌體表達(dá)量。ELISA能實(shí)現(xiàn)對(duì)外泌體特異性蛋白的定量。其他外泌體鑒定方法還有微流體測(cè)定法和外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)分析等。由于外泌體在各種生命過(guò)程中的重要作用及其作為疾病生物標(biāo)志物和藥物輸送系統(tǒng)的潛力，人們對(duì)此領(lǐng)域的興趣越來(lái)越高。盡管目前在技術(shù)上取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步，但尚未建立對(duì)外泌體進(jìn)行準(zhǔn)確和標(biāo)準(zhǔn)化鑒定以及定量的方法，關(guān)于外泌體的量應(yīng)由囊泡顆粒的數(shù)量、囊泡蛋白的量或囊泡數(shù)與蛋白之比來(lái)定義仍存在比較多爭(zhēng)論。建立外泌體分離、表征以及效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問(wèn)題。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。

外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)以及乳凝集素（不成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞）。隨著外泌體研究的不斷深入，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲(chóng)領(lǐng)域。外泌體的品牌有哪些

外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。唾液外泌體提取

外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫(kù)ExoCarta的資料，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān)。外泌體通過(guò)生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌，包括滑膜液，母乳，血液，尿液，唾液，羊水和血液中的血清，這表明它們?cè)诩?xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過(guò)程中去除不必要的蛋白質(zhì)。簡(jiǎn)而言之，它們是天然膜囊泡，將蛋白質(zhì)，RNA，DNA和脂質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞攜帶到另一個(gè)細(xì)胞，調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能。唾液外泌體提取

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