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來源: 發布時間:2023-02-28

外泌體研究背景:胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結構的囊泡狀小體,主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,直徑為30~150nm,密度1.10~1.18g/ml,可攜帶核酸、蛋白質質和脂質等,存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實,外泌體可以通過細胞間轉移核酸、蛋白質、脂質等特定物質,發揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、肉瘤細胞發生了發展、神經細胞信號轉導過程中都發揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成。尿液外泌體提取試劑盒價錢

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透射電子顯微鏡(TEM)和掃描電子顯微鏡(SEM)是用于評估外泌體形態、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像,以區分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒,該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區別在于檢測電子類別,在SEM中,電子與樣品中的粒子相互作用時會發生散射,捕獲并檢測散射的電子,從而生成粒子圖像。但是,在TEM中,不與粒子相互作用的電子穿過樣品,并使用熒光屏進行檢測。電子顯微鏡下外泌體大小不一,通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預處理和制備要求較高,外泌體的提取方法和品質會對電鏡結果造成影響;另外樣品的準備階段比較復雜,不適合進行大量快速的測量;而且由于樣本經過了干燥、固定以及冷凍等預處理和制備過程,對生物樣本的結構會造成一定的破壞,從而影響觀察的效果,無法準確測量外泌體濃度。安徽植物外泌體鑒定磁珠免疫法分離的外泌體,生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。血液外泌體鑒定外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。

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尺寸排阻色譜法(SEC)根據大小來分離樣本。該技術應用了一個裝有多孔聚合物珠的色譜柱,該聚合物珠包含多個孔和通道,分子根據其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時間,而大分子則較早地從柱子上洗脫下來。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相比,SEC分離的外泌體不受剪切力的影響,剪切力可能會改變囊泡的結構。此方法分離到的外泌體純度較高,在電鏡下大小均一,但是獲取量少,所需設備特殊。此外,SEC方法與超濾相結合已被用于尿液來源的外泌體的分離和分析。

胞外囊泡和外泌體的異質性。細胞外囊泡的兩大類是胞外體和外泌體。胞外體通過質膜出芽釋放,大小在50~1mm之間。外泌體起源于內泌體途徑,通過形成包含ILVs的ESEs、LSEs,較終形成多泡體。當MVBs與質膜融合時,外泌體釋放(尺寸范圍~40~160nm)。外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來概念化。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。外泌體是其中一類小囊泡,直徑為30~150nm,密度1.10~1.18g/ml。

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外泌體為細胞療法中的不同合成分子和生物分子的遞送提供了廣闊的前景和嶄新的診療領域。外泌體還顯示出了在診療各種疾病(如心肌病和神經?。┓矫娴臐摿?。但是,在實際應用外泌體之前,需要使用大型動物模型進行進一步研究和臨床試驗。同時需要開發大規模生產質量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術和策略。另外,在研究和評估外泌體的副作用和功效時,必須考慮到肉瘤細胞來源的外泌體可能增強肉瘤生長的潛在風險。外泌體給藥途徑:給藥途徑是獲得所需功效的重要參數。外泌體可以通過多種方法給藥,但是,靜脈內給藥是較常用的途徑。通過利用增強通透性和保留(EPR)效應,在荷瘤動物中靜脈內遞送外來體似乎是有用的。在某些容易達到肉瘤部位的不同惡性肉瘤中,外泌體療法的給藥途徑是瘤內注射。在疾病部位直接注射外泌體的優點是可以特異性地運送裝載的藥物。另外口服給藥,腹腔給藥,皮內給藥和鼻內給藥途徑已成功用于外泌體遞送。外泌體作為蛋白質的藥物遞送載體。外泌體成分鑒定

外泌體普遍參與細胞間物質運輸與信息傳遞,調控細胞生理活動。尿液外泌體提取試劑盒價錢

外泌體病毒傳染:外泌體可以限制或促進病毒傳染。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復制或增強抗病毒免疫來阻止傳染。病毒也可以劫持外泌體的生物發生機制來促進病毒的傳播。外泌體可以作為一個假包膜,通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強病毒進入受體細胞,并幫助逃避抗病毒免疫。病毒組分(蛋白質和miRNA)的共轉運也可能增強傳染性。外泌體介導的病毒轉移可能參與了病毒的遺傳協同和多重傳染.(CMV,巨細胞病毒;HSV-1,1型皰疹病毒)。尿液外泌體提取試劑盒價錢

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