HE染色切片中出現類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發現氧化過度應及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。冰凍組織切片的HE染色。湖南性價比高的HE染色價格
HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應徹底,否則無論進行那種染色都會發生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍色時應及時更換新液。 3.染色的時間長短需依據:染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進行調節。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4.分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵,若分化失當則必然引起染色不勻或過淡,過深等現象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復染后,組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。 山東推薦的HE染色報告科研常備實驗操作之HE染色。
HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標志性結構——肝小葉。顯微鏡首先調4倍物鏡,調準焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結構。人的肝小葉之間結締組織少,小葉分隔不明顯,但動物如豬或小鼠,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結構。肝細胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細胞。20倍物鏡下,肝細胞內染色為藍色的是細胞核,細胞核大而圓,居中,異染色質少而著色淺,能清晰看到核仁。肝細胞胞質豐富,多成嗜酸性,當蛋白質合成旺盛時,胞質內出現散在的嗜堿性物質。肝細胞內有豐富的細胞器比如溶酶體、高爾基體、內質網,等等,但是在光鏡下是無法看到的,需要在電鏡下才能觀察到。當然,肝小葉內除了肝細胞,還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細胞等組織形態,但是在HE染色時并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細胞形態是否完整、胞核有無增大、肝小葉形態是否完整,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用。
HE染色法,。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。而線粒體用HE染色不可見,活細胞通常要求活細胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,再在高倍鏡下觀察。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使、細胞的蛋白質變凝固,以防止細胞后的自溶或細菌的分解,從而保持細胞本來的形態結構。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出塊的中酒精,才能浸蠟包埋。腦組織HE染色如何觀察?
HE染色細胞質過染分析及應對原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在;(2)切片在伊紅染色時間過長;(3)切片在伊紅染色后經乙醇脫水步驟時過的太快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產生。對策:適當稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時間,或者使切片在乙醇脫水等步驟時,停留時間相對均勻。同樣,也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現藍黑色沉淀物分析及應對原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上。對策:每天染色前仔細過濾蘇木精染色液,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產生。關于HE染色,常用的結果分析原理。陜西比較好的HE染色哪家好
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HE染色伊紅著色淡分析及應對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍化液殘留過多;(3)切片太薄;(4)切片經伊紅染色后在乙醇脫水時間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調節在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時不要讓切片在低濃度乙醇停留時間過長,因為含水多的低濃度乙醇會將伊紅的顏色分化掉。湖南性價比高的HE染色價格